[发明专利]一种羊棘球蚴Eg95蛋白抗体间接ELISA检测试剂盒在审
| 申请号： | 201711367335.7 | 申请日： | 2017-12-18 |
| 公开（公告）号： | CN107831319A | 公开（公告）日： | 2018-03-23 |
| 发明（设计）人： | 闫鸿斌;贾万忠;李立;付宝权;李文卉;张念章;吴燕涛 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
| 主分类号： | G01N33/68 | 分类号： | G01N33/68 |
| 代理公司： | 北京中誉威圣知识产权代理有限公司11279 | 代理人： | 席勇 |
| 地址： | 730046 甘肃*** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种羊棘球蚴Eg95蛋白抗体间接ELISA检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括细粒棘球绦虫重组抗原Eg95蛋白预包被酶标板、血清稀释液、酶标记结合物稀释液、阳性对照液、阴性对照液、酶标记结合物、洗涤液、底物显色液和终止液；细粒棘球绦虫重组抗原制备过程中在Eg95基因的前后分别连接了His标签序列和Myc标签序列，然后采用EcoR I和Xho I同时酶切PCR产物和真核表达载体pPIC9K，胶回收目的片段和载体后进行连接，构建重组质粒pPIC9K‑(His‑Eg95‑Myc)，再将重组质粒转化到毕赤酵母GS115菌，经甲醇诱导表达，经Ni‑NTA纯化。本发明采用双标签序列和真核表达载体系统获得的羊棘球蚴病抗体检测试剂盒抗体，具有特异性强、敏感性高、重复性好、易于操作的优点。 | ||
| 搜索关键词： | 种羊 棘球蚴 eg95 蛋白 抗体 间接 elisa 检测 试剂盒 | ||
【主权项】：
一种羊棘球蚴Eg95蛋白抗体间接ELISA检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括细粒棘球绦虫重组抗原Eg95蛋白预包被酶标板、血清稀释液、酶标记结合物稀释液、阳性对照液、阴性对照液、酶标记结合物、洗涤液、底物显色液和终止液；所述细粒棘球绦虫重组抗原是通过以下方法制备的：首先PCR扩增Eg95基因片段，并在Eg95基因的前后分别连接His标签序列和Myc标签序列，然后采用EcoR I和Xho I同时酶切PCR产物和真核表达载体pPIC9K，胶回收目的片段和载体后进行连接，构建重组质粒pPIC9K‑(His‑Eg95‑Myc)，再将重组质粒转化到毕赤酵母GS115菌，经甲醇诱导表达，经Ni‑NTA纯化。
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