[发明专利]HPLC检测枇杷叶中齐墩果酸和熊果酸的方法

摘要

本发明公开了一种HPLC检测枇杷叶中齐墩果酸和熊果酸的方法，包括以下步骤：(1)制备对照品溶液：取齐墩果酸和熊果酸的对照品分别用甲醇制成对照品溶液；(2)制备待测样品溶液：取枇杷叶药材经快速溶剂萃取，获得的萃取液用甲醇稀释，得到待测样品溶液；(3)制定标准曲线：取不同浓度的齐墩果酸和熊果酸的对照品溶液混合后上高效液相色谱仪进行定量测定，分别获得齐墩果酸和熊果酸的标准曲线；(4)测定待测样品溶液：取待测样品溶液上高效液相色谱仪进行定量测定，获得齐墩果酸和熊果酸的峰面积，然后根据齐墩果酸和熊果酸的标准曲线获得待测样品中齐墩果酸和熊果酸的含量。本发明提取效率高，检测简便快速。 1

主权项

1.一种HPLC检测枇杷叶中齐墩果酸和熊果酸的方法，其特征是，包括以下步骤：

(1)制备对照品溶液：取齐墩果酸和熊果酸的对照品分别用甲醇制成对照品溶液；

(2)制备待测样品溶液：取枇杷叶药材经快速溶剂萃取，获得的萃取液用甲醇稀释，得到待测样品溶液；

(3)制定标准曲线：取不同浓度的齐墩果酸和熊果酸的对照品溶液混合后上高效液相色谱仪进行定量测定，分别获得齐墩果酸和熊果酸的标准曲线；

(4)测定待测样品溶液：取待测样品溶液上高效液相色谱仪进行定量测定，获得齐墩果酸和熊果酸的峰面积，然后根据齐墩果酸和熊果酸的标准曲线获得待测样品中齐墩果酸和熊果酸的含量。

2.根据权利要求1所述的HPLC检测枇杷叶中齐墩果酸和熊果酸的方法，其特征是，所述步骤(3)和(4)中的色谱条件：150mm×2.1mm，3μm Thermo Acclaim C30色谱柱，进样量1μ量，以体积比为90∶10的乙腈‑0.2％醋酸溶液为流动相，检测波长为205nm，柱温18℃，体积流量0.2mL/min。

3.根据权利要求1所述的HPLC检测枇杷叶中齐墩果酸和熊果酸的方法，其特征是，所述步骤(1)中，分别精密称取齐墩果酸对照品54.2mg至50mL量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，制成质量浓度为1.084mg/mL对照品溶液；精密称取熊果酸对照品81.6mg至100mL量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，制成质量浓度为0.8160mg/mL对照品溶液。

4.根据权利要求1所述的HPLC检测枇杷叶中齐墩果酸和熊果酸的方法，其特征是，所述步骤(2)中，取枇杷叶药材待测样品研成粉末，精密称取样品粉末0.5g，与1g硅藻土混合均匀后，置预先铺上纤维滤膜的5mL萃取池中，加入硅藻土以填满萃取池为宜，拧紧萃取池上盖，进行快速溶剂萃取，萃取溶剂为甲醇、萃取温度100℃、静态萃取时间6min、冲洗体积100％、静态萃取1次、吹扫时间为100s，萃取结束后，把萃取液转移至25mL量瓶中，用甲醇清洗萃取瓶3次并合并至容量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得待测样品溶液。

5.根据权利要求1所述的HPLC检测枇杷叶中齐墩果酸和熊果酸的方法，其特征是，所述步骤(4)中，不同浓度的齐墩果酸和熊果酸的对照品溶液按体积比为1:1进行混合。