[发明专利]一种乌苏里拟鲿遗传雄性逆转生理雌性鱼育筛方法

摘要

本发明公开了一种乌苏里拟鲿遗传雄性逆转为生理雌性鱼育筛方法，包括鱼苗孵化、试验鱼苗选择、卤虫孵化、雌二醇溶液浸泡卤虫、卤虫作为激素载体饲喂鱼苗、鱼种和成鱼的生理性别观察、遗传性别鉴定步骤。通过优化的程序筛选合适的饲喂起始时间、浸泡卤虫的雌二醇浓度和时间、饲喂的持续处理时间，将遗传雄性个体性逆转为生理雌性个体，使用雄性特异的分子标记鉴定遗传雄性生理雌性个体，将其分塘饲养，按照雄鱼性逆转→人工雌核发育→超雄鱼→全雄鱼的育种技术路线，本发明为乌苏里拟鲿全雄鱼育种在短期内提供大量高质的基础性材料。

主权项

1.一种乌苏里拟鲿遗传雄性逆转生理雌性鱼育筛方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）亲鱼催产；（2）鱼苗孵化；（3）性激素诱导鱼苗性逆转激素浸泡卤虫活饵：将雌二醇用乙醇为溶剂配制成100毫克/毫升的母液，4℃保存，按照150-250微克/升的剂量浸泡卤虫无节幼体1-1.5小时，然后过滤并清洗卤虫；活饵饲喂：鱼苗开口时饲喂未处理活卤虫，按照早、中、晚一日三次，每次以半小时吃完为准，从开口后8-9天，每天三次饲喂激素浸泡卤虫，连续饲喂37-45天，激素饲喂结束，继续饲喂未处理卤虫一段时间后，逐渐改用商品饲料饲喂；（4）遗传雄性逆转生理雌性鱼选筛生理性别检查：经活卤虫饲喂的鱼苗6个月即通过生殖突的有无、生殖孔位置判定生理性别，并可计算性逆转率；遗传性别鉴定：取生理性别一致的雌性鱼若干并标记，剪取尾鳍少许，提取基因组DNA，用雄性特异的引物进行PCR反应，琼脂糖电泳，紫外光检测并拍照，根据雄性特异的扩增片段有无判断其遗传性别，将性逆转成功的个体分拣出来单独饲养作为育种材料。