[发明专利]一种黑果枸杞离体快速繁殖方法

摘要

本发明公开了一种黑果枸杞离体快速繁殖方法，包括以下步骤：选取无菌植株作为外植体供体，将叶片尖部1/2~1/3剪下，近轴面朝下平接在不添加任何植物生长调节剂的MS培养基上；添加蔗糖和琼脂，灭菌，之前用碱溶液调pH值；接种完用散射光培养，待外植体长出根系再置于光周期的光照下培养生芽；芽体可以迅速生长为植株；优点在于：不添加植物生长调节剂，成本低廉、操作简单、一次成苗、所得植株无玻璃化且生长健壮；取叶片为外植体，不影响供体植物的生长；不经过愈伤组织阶段直接成苗，所得植株的体细胞无性系变异频率较低、能在更大程度上保持供体植株的性状；植株移栽之后生长良好，成活率高达100%。

主权项

一种黑果枸杞离体快速繁殖方法，包括以下步骤：1）选取组培瓶内驯化良好的无菌小植株，要求植株健康幼嫩、尚未木质化、生长旺盛、叶片浓绿，无菌实生种苗、组培苗均可；无菌种苗要求在组培瓶内生长1个月以上；培养室光周期为12h，光照强度5500~6500 lx，温度24~26℃，相对湿度25~35%；2）用手术剪在超净工作台内将种苗叶片尖部或中部1/3~1/2剪下，近轴面朝下平接在不添加任何植物生长调节剂的MS培养基上；培养基添加35~40g/L的蔗糖和4.0‑5.0 g/L的琼脂，121℃高压灭菌15~20 min，之前用碱溶液将pH值调为5.4~5.8；将接种完的材料置于培养室的散射光或完全黑暗条件下培养7~15 d散射光强度为8~12lx；待有效外植体均长出根系之后，再将材料置于12h光周期的弱光或者强光条件下培养，弱光为1000~2000lx，强光为5500~6500lx；此条件下根系基部又会产生芽体；芽体可以迅速生长为植株；以上培养均在培养室内进行，温度24~26℃，湿度25~30%，光源均由LED灯管提供；3）叶切片接种1~2月，产生的植株便可移栽；步骤1）中所述的光照强度为6000 lx，温度为25℃，相对湿度30%；步骤2）中所述的散射光强度为10lx；所述弱光强度为1000lx；所述强光强度为5500lx步骤2）中所述的培养基添加40g/L的蔗糖和4.5g/L的琼脂；所述的碱溶液为NaOH或KOH；步骤2）中所述的碱溶液为KOH，pH值调为5.6。