[发明专利]樟树叶烟用香料的制备方法

摘要

本发明公开了一种樟树叶烟用香料的制备方法，通过筛选烟叶表面的微生物，并分离出能产生香气的产香微生物，然后将其与无菌的樟树叶混合进行固体发酵，其后提取发酵产物中的挥发油，稀释得到樟树叶烟用香料。本发明通过微生物发酵的方法来获得烟用香料，可以有效的保存发酵原料中的活性成分，工艺简单，且为香料制备工业提供了一种新途径。所获得的樟树叶烟用香料可在一定程度上降低香烟对人体的伤害，且烟气细腻，平滑，有润感和轻微的甜感，透发性好，喉部刺激性明显减轻，有酿香和发酵的酸香，舌面无明显残留。

主权项

一种樟树叶烟用香料的制备方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：(1)原料准备：①选取樟树叶作为原料、灭菌得到无菌樟树叶备用；②烟叶复合培养基的制备：将烟叶和水按1：5的比例混合后加热至100℃，并保持1～2小时，过滤得到烟水，将烟水和微生物固体培养基按3：7～10的比例混合，制成烟叶复合培养基；(2)产香微生物的筛选：①取烟叶5～10g，加入到无菌蒸馏水中，从中取100～1000μl的液体，滴加到由步骤(1)得到的烟叶复合培养基上，以平板划线分离或稀释涂平板法，在有氧或厌氧条件下培养，长出菌落后，将烟叶复合培养基放到体视镜下筛查，挑取10～50个酵母菌和/或芽孢杆菌的单菌落；②将挑出的单菌落在烟叶复合培养基中分别进行小量扩增培养，将小量扩增培养得到的菌液与无菌樟树叶混合，进行小试量的固体堆积发酵，然后对发酵好的樟树叶采用水蒸气蒸馏法进行提取，获得发酵型樟树叶提取物；③将发酵型樟树叶提取物稀释后添加至香烟中，并通过卷烟加香评吸筛选所需的产香微生物，然后保存筛得的产香微生物的菌种；(3)利用步骤(2)中得到的产香微生物与无菌樟树叶混合，进行固体堆积发酵；①将保存的产香微生物菌种活化：将所述产香微生物的菌种接种到固体PDA培养基上，置于20～37℃的恒温培养箱中培养24～48h使其中的菌种活化，再将活化的菌种接种于PDA液体培养基中，于20～37℃恒温培养24～48h得到的培养液，将所述培养液离心弃除上清液，所得到的沉淀用生理盐水稀释震荡均匀，即得到的活化菌种液；②利用活化菌种液进行固体堆积发酵；(4)对步骤(3)得到的发酵好的樟树叶采用水蒸气蒸馏法进行提取，得到樟树叶烟用香料；其中，所述步骤(2)和步骤(4)中的水蒸气蒸馏法为：将上述发酵好的樟树叶，置于水蒸气蒸馏装置中，按发酵固体与纯净水质量比1：10～15的比例加入的纯净水，加热至100℃，直至发酵固体与水的混合物开始沸腾，连续加热2～10h，收集发酵型樟树叶挥发油，利用95％的乙醇溶液按与挥发油质量比例100～1000：1稀释挥发油，得到樟树叶烟用香料；所述步骤(2)和步骤(3)中的固体堆积发酵为：将产香微生物按照1：1～10的质量比接种到无菌樟树叶中，放置于28～35℃的培养箱中发酵2～7天，得到发酵好的樟树叶。