[发明专利]一种黄精叶片的离体再生培养方法

摘要

本发明涉及生物技术领域，具体来说是一种黄精叶片的离体再生培养方法，包括外植体选择、不定芽诱导、丛生芽增殖、生根培养、炼苗移栽；在本发明的技术方案中，外植体选用组培中处于增殖阶段的长条形大苗或细针形小芽为外植体，通过配制全新培养基，可快速实现黄精的繁殖，可重复性高，取材易得，操作简便，繁殖效率高，大大突破了黄精组培中再生材料单一用根茎及顶芽繁殖的瓶颈问题，可从根本上解决黄精种质退化及常规繁育中周期长、繁殖率低等问题，为满足市场需求、缓解生态压力及工厂化、规范化苗木生产奠定基础。

主权项

一种黄精叶片的离体再生培养方法，其特征在于，步骤包括：（1）外植体选择：选择组培中处于增殖阶段的丛苗，挑选长条形大苗或细针形小芽作为培养材料；（2）不定芽诱导：将步骤（1）选择的外植体材料的叶片从基部切下，接入不定芽培养基，接种时叶片横放，使基部切口的一半接入培养基中，另一半露在培养基外面，培养30‑60天；所述不定芽培养基为：MS、CPPU 0.5‑4 mg/L、2,4‑D 0‑1 mg/L、蔗糖30 g/L、琼脂4.5 g/L，pH为5.8；（3）丛生芽增殖：将上一步诱导的不定芽进行切分，单个接入增殖培养基中，培养30‑35天；所述增殖培养基为：MS、CPPU 0‑2 mg/L、2,4‑D 0‑0.5 mg/L、蔗糖30 g/L 、琼脂4.5g/L，pH为5.8；（4）生根培养：将增殖的丛芽2‑3个为一组切下，接种至生根培养基，进行生根培养13‑15天；所述生根培养基为：1/2MS、NAA 0‑1 mg/L、IBA 0‑1 mg/L、蔗糖30 g/L、琼脂4.5g/L，pH为5.8；（5）炼苗移栽：待组培苗根长2‑4 cm，根数3‑6根时，将瓶子放置在炼苗棚中培养1周后打开瓶盖，适量喷水培养3天后移栽至炼苗基质中。