[发明专利]一种定点标记的泛素特异性蛋白酶7及其制备方法和应用在审

专利信息
申请号: 201711436434.6 申请日: 2017-12-26
公开(公告)号: CN109957559A 公开(公告)日: 2019-07-02
发明(设计)人: 金宗文;杨偲;袁静;罗擎颖;刘琳 申请(专利权)人: 深圳先进技术研究院
主分类号: C12N9/50 分类号: C12N9/50;C12N15/57;C12N15/70
代理公司: 北京品源专利代理有限公司 11332 代理人: 巩克栋
地址: 518055 广东省深圳*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 发明公开了一种定点标记的泛素特异性蛋白酶7及其制备方法和应用,所述泛素特异性蛋白酶7进行定点突变后,采用带有标记基团的非天然氨基酸进行定点标记,其中,所述带有标记基团的非天然氨基酸通过tRNA合成酶/tRNA对引入;本发明通过优化蛋白表达流程,选择特定的标签及表达载体,并通过tRNA合成酶和tRNA对引入非天然氨基酸,各步骤各条件协同增效,提高了蛋白的表达量并完成了定点标记,操作简便,易于推广,不影响蛋白酶7的结构和活性,具有广阔的应用前景和巨大的市场价值。
搜索关键词: 定点标记 泛素特异性蛋白酶 非天然氨基酸 制备方法和应用 标记基团 影响蛋白酶 表达载体 蛋白表达 定点突变 协同增效 引入 表达量 蛋白 标签 应用 优化
【主权项】:
1.一种定点标记的泛素特异性蛋白酶7,其特征在于,所述泛素特异性蛋白酶7进行定点突变后,采用带有标记基团的非天然氨基酸进行定点标记;其中,所述泛素特异性蛋白酶7带有Strep标签;所述带有标记基团的非天然氨基酸通过tRNA合成酶/tRNA对引入。
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