[发明专利]一种定点标记的泛素特异性蛋白酶7及其制备方法和应用在审
申请号: | 201711436434.6 | 申请日: | 2017-12-26 |
公开(公告)号: | CN109957559A | 公开(公告)日: | 2019-07-02 |
发明(设计)人: | 金宗文;杨偲;袁静;罗擎颖;刘琳 | 申请(专利权)人: | 深圳先进技术研究院 |
主分类号: | C12N9/50 | 分类号: | C12N9/50;C12N15/57;C12N15/70 |
代理公司: | 北京品源专利代理有限公司 11332 | 代理人: | 巩克栋 |
地址: | 518055 广东省深圳*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种定点标记的泛素特异性蛋白酶7及其制备方法和应用,所述泛素特异性蛋白酶7进行定点突变后,采用带有标记基团的非天然氨基酸进行定点标记,其中,所述带有标记基团的非天然氨基酸通过tRNA合成酶/tRNA对引入;本发明通过优化蛋白表达流程,选择特定的标签及表达载体,并通过tRNA合成酶和tRNA对引入非天然氨基酸,各步骤各条件协同增效,提高了蛋白的表达量并完成了定点标记,操作简便,易于推广,不影响蛋白酶7的结构和活性,具有广阔的应用前景和巨大的市场价值。 | ||
搜索关键词: | 定点标记 泛素特异性蛋白酶 非天然氨基酸 制备方法和应用 标记基团 影响蛋白酶 表达载体 蛋白表达 定点突变 协同增效 引入 表达量 蛋白 标签 应用 优化 | ||
【主权项】:
1.一种定点标记的泛素特异性蛋白酶7,其特征在于,所述泛素特异性蛋白酶7进行定点突变后,采用带有标记基团的非天然氨基酸进行定点标记;其中,所述泛素特异性蛋白酶7带有Strep标签;所述带有标记基团的非天然氨基酸通过tRNA合成酶/tRNA对引入。
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