[发明专利]一种分离高纯度茶籽皂素单体的方法

摘要

本发明涉及天然化合物的分离纯化制备领域，具体地说是一种分离高纯度茶籽皂素单体的方法，涉及茶籽中6个高纯度五环三萜齐墩果烷型皂素的分离纯化。本发明与现有技术相比本发明的有益效果是：(a)化合物纯度较高，纯度在91‑99％；(b)分离过程简单，能同时得到茶籽中6个主要的单体皂素物质；(c)重复性好，针对性强。

主权项

1.一种分离高纯度茶籽皂素单体的方法，包括如下步骤：(1)茶籽去壳，烘干过筛，得到茶籽粉末；(2)在步骤(1)的茶籽粉末加入70％‑80％乙醇以1:15‑20(w/v)的料液比70‑80℃回流提取5‑7小时，抽滤收集提取液，45℃真空旋转浓缩得浓缩液；(3)将步骤(2)浓缩液以1:1(v/v)石油醚萃取两次，收集水相溶液；1:1(v/v)乙酸乙酯萃取两次收集水相溶液；1:1(v/v)正丁醇萃取两次收集正丁醇相；70℃真空旋转浓缩得样品。(4)将样品上D101大孔树脂柱，静态吸附5‑8小时，用20‑30％乙醇和60‑80％乙醇分别洗脱三个柱体积，收集70％‑80％乙醇洗脱部分45℃真空旋转浓缩后冷冻干燥成粉得到总皂素；(5)步骤(4)中收集到的总皂素在中低压色谱系统中进一步分离：采用C‑18制备柱，柱温25℃，检测波长210nm，两次过柱；第一次等梯度洗脱，流动相为50％乙腈水溶液(含0.1％甲酸)，流速2.0ml/min，洗脱30min；第二次流动相：A相(0.1％甲酸/水)‑B相(0.1％甲酸/乙腈)；梯度洗脱：0‑15min 38％B，15‑50min 40％B，流速1.5ml/min，分离得到茶籽皂素单体。