[发明专利]一种基于电化学发光体系的透明质酸酶检测方法

摘要

本发明公开了一种基于电化学发光体系的透明质酸酶检测方法，借助透明质酸‑六水合三(2,2‑联吡啶)氯化钌体系，构建了一个用于检测透明质酸酶的电化学发光体系。透明质酸酶可以对透明质酸进行酶切反应，酶切后的透明质酸片段连同静电吸附在透明质酸片段上的六水合三(2,2‑联吡啶)氯化钌可以通过离心超滤进入到超滤液中。因此当透明质酸酶存在时，超滤液中的发光物质六水合三(2,2‑联吡啶)氯化钌的量会增加，发光体系的电化学发光强度会增强，基于此可以实现对透明质酸酶浓度的检测。本发明方法原料易得、操作简单、耗时较短而且灵敏度高，有望在生命科学及医学临床检测等领域得到广泛应用。

主权项

1.一种基于电化学发光体系的透明质酸酶检测方法，其特征在于：其包括以下步骤：步骤S1：制备透明质酸‑六水合三(2,2‑联吡啶)氯化钌混合液组成的电化学发光体系；步骤S2：将不同浓度的透明质酸酶分别加入到上述发光体系内，进行酶切反应，反应后所得的各混合溶液分别进行离心超滤，收集各超滤液，将各超滤液分别与PBS缓冲液混合均匀，或者将各超滤液分别与正三丙胺和PBS缓冲液混合均匀，得到不同的混合体系，使用BPCL微弱化学发光测量仪测量各混合体系的电化学发光信号；步骤S3：根据收集的各混合体系的电化学发光信号，绘制标准曲线；步骤S4：将待测样品加入根据步骤S1制备的发光体系内，反应后所得的混合溶液进行离心超滤，收集待测超滤液，将待测超滤液与正三丙胺、PBS缓冲液混合均匀，得到待测体系，使用BPCL微弱化学发光测量仪测量该待测体系的电化学发光信号，将该电化学发光信号结合标准曲线，得出待测样品中透明质酸酶浓度。