[发明专利]一种报春石斛的组织培养育苗方法

摘要

本发明公开了一种报春石斛的组织培养育苗方法，包括以下步骤：外植体的选择、外植体的消毒、播种、继代培养、生根培养、炼苗和驯化移栽。该方法结合报春石斛的分化、生长特点，选择了合适的消毒方式、光照强度、温度和培养基，以高效、经济的方式，得到了报春石斛植株，具有较好的应用前景。

主权项

1.一种报春石斛的组织培养育苗方法，包括以下步骤：1)外植体的选择：选外种壳黄绿色、完好无裂的果荚作为外植体，冷藏；2)外植体的消毒：取步骤1)得到的外植体，用洗涤液浸泡，刷净果荚表皮，洗净，在无菌环境下用医用酒精浸泡消毒，再依次采用次氯酸钠、升汞消毒，冲洗干净；3)播种：将步骤2)消毒后的外植体解剖，取果荚中的果粉，将果粉撒至初代培养基，置于24℃‑26℃、光照强度为2000‑2500lx，光照时间为10‑12小时/天的条件下，培养至果粉萌发；所述初代培养基为含有蔗糖和琼脂粉的1/2MS培养基；4)继代培养：果粉萌发后，将光照强度上调400‑600lx，继续培养至种苗长2‑3cm，移至继代培养基，培养至种苗长5‑6cm；所述继代培养基为含有萘乙酸、6‑BA、蔗糖、琼脂粉、土豆汁和活性碳粉的1/2MS培养基；5)生根培养：将继代培养后的种苗置于生根培养基中继续培养，所述生根培养基为含有萘乙酸、6‑BA、蔗糖、琼脂粉、土豆汁、香蕉汁和活性碳粉的MS培养基；6)炼苗、驯化移栽：待根充分发育后，将种苗连同生根培养基置于大棚中炼苗；将种苗取出清洗，用多菌灵稀释液浸泡，洗净阴干水分，将种苗至于基质中驯化。