[发明专利]一种葱属植物鳞茎组织培养方法

摘要

本发明公开一种葱属植物鳞茎组织培养方法，包括如下步骤：选取葱属植物地下鳞茎为外植体，消毒处理；将外植体接种于含有浓度为0.1‑0.5mg/L的2,4‑二氯苯氧乙酸、0.1‑1.0mg/L的噻苯隆和0.5‑1.5mg/L的维生素B₆的MS培养基中，依次进行热激处理、避光培养和光照培养；将外植体移植到含有浓度为0.1‑0.5mg/L的吲哚丁酸、0.1‑1.0mg/L的噻苯隆和8‑10mg/L的维生素B₁的White培养基中生根培养。本发明根据不同培育阶段的营养需要，使用不同的培养基，同时辅助相应的培育手段，协同作用，有效提高不定芽诱导效率和生根率，提高增殖率，增殖时间短，繁育速度快。

主权项

1.一种葱属植物鳞茎组织培养方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)选取葱属植物的地下鳞茎作为外植体，进行消毒处理；(2)将消毒处理后的所述外植体接种于含有0.1‑0.5mg/L的2,4‑二氯苯氧乙酸、0.1‑1.0mg/L的噻苯隆和0.5‑1.5mg/L的维生素B6的MS培养基中，而后对所述外植体依次进行热激处理、避光培养和光照培养；(3)将步骤(2)得到的所述外植体移植到含有0.1‑0.5mg/L的吲哚丁酸、0.1‑1.0mg/L的噻苯隆和8‑10mg/L的维生素B1的White培养基中进行生根培养；其中，所述步骤(2)中所述热激处理的方法为，在30‑40℃下避光培养3‑5天；所述步骤(2)中所述避光培养的方法为，在22‑28℃下避光培养10‑20天；所述步骤(2)中所述光照培养的条件为，光照强度1000‑1500Lx，光照时间14‑20h/天，温度22‑28℃，培养时间10‑20天；所述步骤(3)中所述培养的条件为，光照强度1500‑3000Lx，光照时间14‑20h/天，温度22‑28℃；所述MS培养基由如下制备方法制得：配置MS大量元素母液，称取76.0g的KNO3、66.0g的NH4NO3、14.8g的MgSO4·7H2O、17.6g的CaCl2·2H2O、13.28g的无水CaCl2，称量完毕后，分别用蒸馏水溶解后混合，最后定容到1L；配置MS微量元素母液，称取2.23g的MnSO4·H2O、0.86g的ZnSO4·7H2O、0.62g的H3BO3、0.083g的KI、0.025g的Na2MoO4·2H2O、0.0025g的CuSO4·5H2O、0.0025g的CoCl2·6H2O，称量完毕后，分别用蒸馏水溶解后混合，最后定容到1L；配置MS肌醇母液，称取10.0g的肌醇、0.1g的烟酸，称量完毕后，分别用蒸馏水溶解后混合，最后定容到1L；配置MS铁盐母液，称取2.78g的FeSO4·7H2O、3.73g的Na2EDTA，称量完毕后，分别用蒸馏水溶解后混合，最后定容到1L；将MS微量元素母液、MS肌醇母液、MS铁盐母液分别稀释100倍后与稀释了40倍的MS大量元素母液按等比例混合，即得；所述White培养基由如下制备方法制得：配置White大量元素母液，称量287mg的Ca(NO3)2·4H2O、80mg的KNO3、738mg的MgSO4·7H2O、453mg的Na2SO4·10H2O、65mg的KCl、19.1mg的NaH2PO4·H2O，称量完毕后，分别用蒸馏水溶解后混合，最后定容到1L；配置White微量元素母液，称量6.6mg的MnSO4·4H2O、1.5mg的H3BO3、2.7mg的ZnSO4·7H2O、0.75mg的KI，称量完毕后，分别用蒸馏水溶解后混合，最后定容到1L；配置White有机物母液，称量3.0mg的甘氨酸、0.5mg的烟酸、2.0mg的柠檬酸，称量完毕后，分别用蒸馏水溶解后混合，最后定容到1L；将White微量元素母液、White有机物母液分别稀释100倍后与稀释了40倍的White大量元素母液按等比例混合，即得。