[发明专利]基于血清标志物MMP-7的胆道闭锁诊断试剂盒

摘要

本发明涉及一种基于血清标志物MMP‑7的胆道闭锁诊断试剂盒，所述诊断试剂盒包括抗人MMP‑7单克隆抗体包被的酶标板、阴性对照液、阳性对照液、酶标试剂、酶底物溶液、封闭液、样品稀释液、洗涤液和终止液；与现有技术相比，本发明提供了一种新的灵敏、安全、可靠、易操作的商品化试剂盒，定量测定人血清中MMP‑7的水平，有助于早期诊断BA；提供的血清生物标志物蛋白质MMP‑7诊断BA的敏感性为100％，特异性为95.6％，具有高特异性和高敏感性的特点；提高BA的早期诊断率，减少误诊，提高BA自身肝脏生存率。

主权项

1.一种基于血清标志物MMP‑7的胆道闭锁诊断试剂盒，该诊断试剂盒包括抗人MMP‑7抗体包被的酶标板，阳性对照液，样品稀释液，酶标试剂A、酶标试剂B，酶底物溶液，洗涤液和终止液；所述阳性对照液为含有MMP‑7的稀释于样品稀释液中血清，含MMP‑7浓度为40ng/mL。所述样品稀释液为0.01mol/L pH 7.4PBS；阴性对照液即为样品稀释液。所述酶标试剂A为生物素化的MMP‑7抗体，酶标试剂B为HRP标记的亲和素，浓度为0.1‑111g/mL。所述酶底物溶液为3,3',5,5'‑四甲基联苯胺溶液，包括显色剂A和显色剂B，显色剂A为500mL溶液中含有醋酸纳13.6g、柠檬酸1.6g和30％双氧水0.3mL；显色剂B为500mL溶液中含有TMB 350mg、二甲亚砜20mL和柠檬酸.H2O 5.1g。所述洗涤液为0.0lmol/L pH 7.4磷酸盐‑NaCl缓冲液PBST，PBST内含0.05％吐温20，即1升溶液中含8g NaCl、0.2g KH2PO4、2.9g Na2HPO4‑12H2O、0.2g KCl和0.5mL Tween‑20。所述终止液为2mol/L H2SO4溶液。