[发明专利]一种禽白血病病毒的化学发光抗原定量检测试剂盒及其检测方法

摘要

本发明涉及一种禽白血病病毒的化学发光抗原定量检测试剂盒及检测方法，属于免疫检测领域，该试剂盒包括化学发光板、标记抗体、过氧化物溶液、校准品、样品稀释液和洗涤液，其中，化学发光板包被有抗p27蛋白的单克隆抗体Ⅰ，标记抗体为异米鲁诺标记的抗p27蛋白的单克隆抗体Ⅱ；单克隆抗体Ⅰ和单克隆抗体Ⅱ为配对抗体；校准品是由高纯度P27蛋白配制的；过氧化物溶液为含有乙酰氨基酚的过氧化氢溶液；样品稀释液为含有马血清、曲拉通和S9的磷酸盐缓冲液。本发明利用高纯度P27蛋白和一对配对单克隆抗体制备的禽白血病毒化学发光抗原定量检测试剂盒，其敏感性高，特异性性好，稳定性强，具有良好的可靠性，为更好地净化鸡群禽白血病奠定了基础。

主权项

1.一种禽白血病病毒的化学发光抗原定量检测试剂盒，包括化学发光板、标记抗体、过氧化物溶液、校准品、样品稀释液和洗涤液，其特征在于：所述化学发光板包被有抗禽白血病病毒p27蛋白的单克隆抗体Ⅰ，包被浓度为0.5～0.8ug/ml；标记抗体为异米鲁诺标记的抗禽白血病病毒p27蛋白的单克隆抗体Ⅱ；所述异鲁米诺的标记过程为：将异鲁米诺溶于盐酸溶液中，加入亚硝酸钠，避光反应15min，得混合液；用硼砂缓冲液调节混合液pH，再加入纯化好的抗禽白血病病毒p27蛋白的单克隆抗体Ⅱ，低温条件下避光反应，透析，得标记抗体，‑20℃保存；所述单克隆抗体Ⅰ和单克隆抗体Ⅱ均属于IgG2a亚类且为配对抗体；所述校准品是由纯度大于97%的P27蛋白配制的；所述过氧化物溶液为体积分数为0.06%的过氧化氢水溶液，其中含有0.6g/L的乙酰氨基酚；所述样品稀释液为10mM的pH值为6.8‑7.6的磷酸盐缓冲液，其中含有体积分数为5.0%‑15.0%的马血清、体积分数为0.1%‑0.5%的曲拉通‑100和质量分数为0.05%‑0.6%的S9。