[发明专利]检测PD‑1敲除的或低表达的T细胞对肿瘤细胞杀伤性的方法在审
| 申请号： | 201711466651.X | 申请日： | 2017-12-28 |
| 公开（公告）号： | CN107904282A | 公开（公告）日： | 2018-04-13 |
| 发明（设计）人： | 吴海涛;聂慧蓉;沈政;施念;吴灵 | 申请（专利权）人： | 北昊干细胞与再生医学研究院有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/66 | 分类号： | C12Q1/66;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 广州华进联合专利商标代理有限公司44224 | 代理人： | 万志香 |
| 地址： | 510630 广东省广州市黄埔区*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种检测PD‑1敲除或低表达的T细胞对肿瘤细胞杀伤能力的方法，所述方法是通过构建稳定表达荧光素酶、绿色荧光蛋白和PD‑L1的肿瘤细胞系，然后应用化学发光酶标仪检测检测肿瘤细胞化学发光强度从而测定对肿瘤细胞杀伤能力。本发明所述检测方法，简单易操作，稳定性强，准确度高，为过继性免疫细胞治疗提供了良好的技术支持。 | ||
| 搜索关键词： | 检测 pd 表达 细胞 肿瘤 杀伤性 方法 | ||
【主权项】：
一种检测PD‑1敲除的或低表达的T细胞对肿瘤细胞杀伤能力的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)对待检测的肿瘤细胞进行处理，得到稳定表达荧光素酶和绿色荧光蛋白的肿瘤细胞系；(2)取正在培养的稳定表达荧光素酶和绿色荧光蛋白的肿瘤细胞系，用胰酶消化，终止消化后，离心重悬；(3)设置检测组和对照组，检测组中，将PD‑1基因敲除的或PD‑1基因低表达的T细胞，加入到步骤(2)重悬后的肿瘤细胞系中，共孵育12‑20个小时；对照组中，以PD‑1基因未敲除的或PD‑1基因高表达的T细胞，进行上述相同操作；(4)孵育完成后，加入荧光素底物，振荡混匀后，立即使用化学发光酶标仪检测肿瘤细胞的化学发光强度。
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