[发明专利]一种基于人纤维连接蛋白Ⅲ型结构域展示双抗原表位制备抗原替代物的方法在审
| 申请号： | 201711469025.6 | 申请日： | 2017-12-29 |
| 公开（公告）号： | CN108179152A | 公开（公告）日： | 2018-06-19 |
| 发明（设计）人： | 胡学军;阮瑶;丁宁;付鑫;杨春光;张伟峻 | 申请（专利权）人： | 大连大学 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N15/12;C12N1/21;G01N33/58;G01N33/68;C12R1/19 |
| 代理公司： | 大连八方知识产权代理有限公司 21226 | 代理人： | 朱秀芬 |
| 地址： | 116622 辽*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 本发明公开一种应用人纤维连接蛋白Ⅲ型结构域(Fn3)展示两个抗原表位用于制备抗原替代物的方法。该方法通过基因重组，分别将编码抗原的两个表位碱基序列重组在编码Fn3基因序列的FG loop区和3′端，构成Fn3与双抗原表位融合基因。利用大肠杆菌表达系统高效、快速地表达和制备Fn3展示双抗原表位的融合蛋白。本发明的有益效果是可以简单、快速、高效制备具有展示双抗原表位的抗原替代物，为生产相应的免疫学检测建立技术平台。 | ||
| 搜索关键词： | 抗原表位 替代物 抗原 制备 人纤维连接蛋白 结构域 展示 大肠杆菌表达系统 免疫学检测 编码抗原 高效制备 基因序列 基因重组 技术平台 碱基序列 融合蛋白 融合基因 表位 应用 生产 | ||
【主权项】：
1.一种基于人纤维连接蛋白Ⅲ型结构域展示双抗原表位制备抗原替代物的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)通过基因重组，构建能在大肠杆菌中表达人纤维连接蛋白Ⅲ型结构域展示双抗原表位的重组蛋白表达载体；(2)将步骤(1)中构建的重组蛋白表达载体转化大肠杆菌工程菌株，筛选出阳性转化子；(3)将步骤(2)筛选出的阳性转化子进行诱导表达和纯化，获得所需重组蛋白。
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