[发明专利]一种恒温固相重组杂交方法在审
| 申请号： | 201711477550.2 | 申请日： | 2017-12-29 |
| 公开（公告）号： | CN108034698A | 公开（公告）日： | 2018-05-15 |
| 发明（设计）人： | 张睿;李博安;詹尔昌 | 申请（专利权）人： | 博迪泰（厦门）生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6834 | 分类号： | C12Q1/6834 |
| 代理公司： | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人： | 郭锦辉 |
| 地址： | 361000 福建省*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | 本发明公开一种恒温固相重组杂交方法，所述重组杂交方法包括以下步骤：(1)用标记引物扩增待测靶标核酸序列，产生标记双链靶标核酸；(2)将单链DNA探针嵌入或者吸附于固相介质表面，所述探针包含与待检测的标记双链靶标核酸序列互补的核酸序列；(3)水化步骤(2)中的固相介质表面，释放探针；(4)使探针与靶标核酸发生特异性重组杂交；(5)去除未杂交的或者非特异性杂交的扩增核酸产物；(6)加入针对靶标核酸标记物的结合物‑呈色剂复合体，结合相应的标记靶标核酸并呈色；(7)根据呈色情况检测样品中是否含有靶标核酸。本发明的重组杂交方法大幅减少了操作时间、步骤和复杂度。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 恒温 重组 杂交 方法 | ||
【主权项】：
1.一种恒温固相重组杂交方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)用标记引物扩增待测靶标核酸序列，产生标记双链靶标核酸；(2)将单链DNA探针嵌入或者吸附于固相介质表面，所述探针包含与待检测的标记双链靶标核酸序列互补的核酸序列；(3)水化步骤(2)中的固相介质表面，释放探针；(4)将步骤(1)中扩增的标记双链靶标核酸与含有重组酶的恒温杂交缓冲液在固相介质表面共孵育，使探针与靶标核酸发生特异性重组杂交；(5)去除未杂交的或者非特异性杂交的扩增核酸产物；(6)加入针对靶标核酸标记物的结合物-呈色剂复合体，结合相应的标记靶标核酸并呈色；(7)根据呈色情况检测样品中是否含有靶标核酸。
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