[发明专利]一种含盐霉素发酵液的预处理方法和盐霉素化学效价的测定方法

摘要

本发明提供了一种含盐霉素发酵液的预处理方法，属于化学效价测定技术领域，包括以下步骤：1)将含有盐霉素的发酵液用无水乙醇稀释，得到第一稀释液；2)将所述步骤1)得到的第一稀释液进行超声萃取，得到萃取液，将所述萃取液过滤，得到的液相部分为预处理液，所述超声萃取的功率为450～550W，所述超声萃取的时间为10～30min。与振荡萃取相比，本发明提供的预处理方法不仅节省了每个样品的萃取时间，而且萃取更完全。 1

主权项

1.一种含盐霉素发酵液的预处理方法，包括以下步骤：

1)将含有盐霉素的发酵液用无水乙醇稀释，得到第一稀释液；

2)将所述步骤1)得到的第一稀释液进行超声萃取，得到萃取液，将所述萃取液过滤，得到的液相部分为预处理液，所述超声萃取的功率为450～550W，所述超声萃取的时间为10～30min。

2.根据权利要求1所述的预处理方法，其特征在于，所述步骤1)中含有盐霉素的发酵液与无水乙醇的体积比为(2～7):(40～50)。

3.根据权利要求1所述的预处理方法，其特征在于，所述步骤2)超声萃取的频率为35～45KHz。

4.一种盐霉素化学效价的测定方法，包括以下步骤：

a.将权利要求1～3任意一项所述预处理方法得到的预处理液用无水乙醇进行稀释，得到第二稀释液，根据稀释后预处理液的效价为20～140u/mL来确定预处理液稀释倍数和稀释用无水乙醇的体积，所述预处理液稀释倍数＝预估效价/1000，所述稀释用无水乙醇的体积＝预估效价/1000‑1；

b.将所述步骤a得到的第二稀释液与香兰素溶液、无水乙醇混合，得到含有香兰素和盐霉素的混合液；

c.将所述步骤b得到的含有香兰素和盐霉素的混合液在50～70℃的条件下水浴25～35min，得到检测液；

d.将所述步骤c得到的检测液在530nm下检测吸光度，根据所述检测到的吸光度和预定标准曲线，得到检测液的化学效价，所述检测液的化学效价乘以总稀释倍数得到含盐霉素的发酵液的盐霉素化学效价，所述总稀释倍数为步骤a所述的预处理液稀释倍数乘以步骤1)含有盐霉素的发酵液的稀释倍数。

5.根据权利要求4所述的测定方法，其特征在于，所述步骤b香兰素溶液的质量百分含量为1～5％。

6.根据权利要求4或5所述的测定方法，其特征在于，所述步骤b中第二稀释液、香兰溶液与无水乙醇的体积比为(0.5～1.5):(0.5～1.5):(6～10)。