[发明专利]一种稳定共表达鸡源BCRP和P-gp转运体的MDCK细胞模型及其构建方法与应用在审

专利信息
申请号: 201711479521.X 申请日: 2017-12-29
公开(公告)号: CN108330100A 公开(公告)日: 2018-07-27
发明(设计)人: 王丽平;张瑜娟;黄金虎 申请(专利权)人: 南京农业大学
主分类号: C12N5/10 分类号: C12N5/10;C12N15/867;C12Q1/02
代理公司: 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 代理人: 曹翠珍
地址: 210095 *** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明公开了一种稳定共表达鸡源BCRP和P‑gp转运体的MDCK细胞模型及其构建方法与应用。该细胞模型的名称为MDCK‑chBCRP/P‑gp;制备方法为分别构建含鸡BCRP和鸡P‑gp慢病毒的表达载体,然后分别转染293T细胞得到含鸡BCRP和鸡P‑gp的慢病毒,再依次感染MDCK细胞,依次经含1μg/mL的嘌呤霉素和1200µg/ml新霉素培养液筛选后得到稳定表达鸡BCRP和鸡P‑gp转运体的MDCK细胞模型。本发明的细胞模型可用于鸡BCRP和鸡P‑gp对其共同底物转运规律的研究,在禽类药物开发上有很好的应用前景。
搜索关键词: 转运体 构建 细胞模型 共表达 慢病毒 鸡源 培养液 应用 表达载体 底物转运 稳定表达 药物开发 嘌呤霉素 新霉素 可用 禽类 转染 制备 筛选 细胞 感染 研究
【主权项】:
1.一种稳定共表达鸡源BCRP和P‑gp转运体的MDCK细胞模型,其特征在于,分别构建含鸡BCRP和鸡P‑gp的慢病毒表达载体,然后分别转染293T细胞得到含鸡BCRP和鸡P‑gp的慢病毒,再依次感染MDCK细胞,依次经含1μg/mL 的嘌呤霉素和1200µg/ml新霉素培养液筛选后得到稳定表达鸡BCRP和鸡P‑gp转运体的MDCK细胞模型,即MDCK‑chBCRP/P‑gp。
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