[发明专利]用于胃癌相关基因Reprimo、RNF180甲基化检测的引物对、试剂盒及方法

摘要

本发明涉及一种用于胃癌相关基因Reprimo、RNF180甲基化检测的引物对。所述引物对包括Reprimo、RNF180及β‑Actin正向引物、反向引物及检测探针。本发明涉及一种用于胃癌相关基因Reprimo、RNF180甲基化检测的试剂盒。所述试剂盒包括含有上述引物及探针的PCR反应液，其包括上述正向引物、反向引物及检测探针，10×PCR buffer、dNTP、Mg2+、无核酸酶水及Ex Taq酶。本发明还涉及一种用于胃癌相关基因Reprimo、RNF180甲基化检测的方法。本发明提供的试剂盒及其检测方法具有检测结果准确、灵敏性高、通量高、特异性好、检测时间快速的优点。

主权项

一种用于胃癌相关基因Reprimo、RNF180甲基化检测的引物对，其特征在于，包括针对Reprimo基因与RNF180基因的启动子区以及β‑Actin内参基因的特异性引物及探针，如下：Reprimo正向引物：5'‑TGCGAGTGAGCGTTTAGTTC‑3'，Reprimo反向引物：5'‑TCCGTCTAATTACCTAAAACCGA‑3'，Reprimo检测探针：5'‑AACGAACGAACGCCGCGAACGAC‑3'；RNF180正向引物：5'‑TGCGGGGTTTGGTTTTTGT‑3'，RNF180反向引物：5'‑AAAACCTCCAACTTCACACCC‑3'，RNF180检测探针：5'‑CGTCGTCGGAGTCGTAGCGAGTTT‑3'；其中，所述Reprimo检测探针及RNF180检测探针的5'端分别使用FAM，VIC标记作为发光基团，3'端均使用BHQ1作为淬灭基团；β‑Actin正向引物：5'‑ATTTGAGATGTATGAAGGTTTTTGG‑3'，β‑Actin反向引物：5'‑ACACCACAAAATCACACTTAACCT‑3'，β‑Actin检测探针：5'‑AAACCCTAACTACCTCCACCCACTCCCA‑3'；其中，所述β‑Actin检测探针的5'端使用ROX标记作为发光基团，3'端使用BHQ2作为淬灭基团。