[发明专利]一种纯化蛋白的方法有效

专利信息
申请号: 201711492741.6 申请日: 2017-12-30
公开(公告)号: CN108003243B 公开(公告)日: 2021-10-12
发明(设计)人: 王天泽;郝淑静 申请(专利权)人: 北京中科唯新生物医学研究所有限公司
主分类号: C07K19/00 分类号: C07K19/00;C07K1/18;C07K1/26;C12N15/70
代理公司: 北京展翅星辰知识产权代理有限公司 11693 代理人: 魏威
地址: 102206 北京市昌平区*** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明提供了一种纯化蛋白的方法,上述方法包括如下步骤:1)选择S100蛋白家族构建待纯化蛋白的重组融合蛋白表达载体;2)上述重组融合蛋白的表达:得到表达菌体;3)上述重组融合蛋白的分离纯化:收集上述表达菌体,破碎上述表达菌体的细胞,离心并收集含上述重组融合蛋白的上清液,上述上清液进行阴离子交换柱初步分离,经过上样、洗脱并收集混合在300至400毫升范围内的洗脱液样品,向上述洗脱液样品中加入氯化钙(CaCl2),上疏水层析柱,得到上述疏水层析柱纯化后的融合蛋白;4)电泳鉴定;5)酶切纯化上述疏水层析柱纯化后的融合蛋白。本发明提出的新的纯化蛋白的方法,操作方便,成本低,纯化效果好。
搜索关键词: 一种 纯化 蛋白 方法
【主权项】:
1.一种纯化蛋白的方法,其特征在于:所述方法包括如下步骤:1)选择S100蛋白家族构建待纯化蛋白的重组融合蛋白表达载体;2)所述重组融合蛋白的表达:得到表达菌体;3)所述重组融合蛋白的分离纯化:收集所述表达菌体,破碎所述表达菌体的细胞,离心并收集含所述重组融合蛋白的上清液,所述上清液进行阴离子交换柱初步分离,经过上样、洗脱并收集混合在300至400毫升范围内的洗脱液样品,向所述洗脱液样品中加入氯化钙(CaCl2),上疏水层析柱,得到所述疏水层析柱纯化后的融合蛋白;4)电泳鉴定;5)酶切纯化所述疏水层析柱纯化后的融合蛋白。
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