[发明专利]一种纯化蛋白的方法有效
申请号: | 201711492741.6 | 申请日: | 2017-12-30 |
公开(公告)号: | CN108003243B | 公开(公告)日: | 2021-10-12 |
发明(设计)人: | 王天泽;郝淑静 | 申请(专利权)人: | 北京中科唯新生物医学研究所有限公司 |
主分类号: | C07K19/00 | 分类号: | C07K19/00;C07K1/18;C07K1/26;C12N15/70 |
代理公司: | 北京展翅星辰知识产权代理有限公司 11693 | 代理人: | 魏威 |
地址: | 102206 北京市昌平区*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: |
本发明提供了一种纯化蛋白的方法,上述方法包括如下步骤:1)选择S100蛋白家族构建待纯化蛋白的重组融合蛋白表达载体;2)上述重组融合蛋白的表达:得到表达菌体;3)上述重组融合蛋白的分离纯化:收集上述表达菌体,破碎上述表达菌体的细胞,离心并收集含上述重组融合蛋白的上清液,上述上清液进行阴离子交换柱初步分离,经过上样、洗脱并收集混合在300至400毫升范围内的洗脱液样品,向上述洗脱液样品中加入氯化钙(CaCl |
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搜索关键词: | 一种 纯化 蛋白 方法 | ||
【主权项】:
1.一种纯化蛋白的方法,其特征在于:所述方法包括如下步骤:1)选择S100蛋白家族构建待纯化蛋白的重组融合蛋白表达载体;2)所述重组融合蛋白的表达:得到表达菌体;3)所述重组融合蛋白的分离纯化:收集所述表达菌体,破碎所述表达菌体的细胞,离心并收集含所述重组融合蛋白的上清液,所述上清液进行阴离子交换柱初步分离,经过上样、洗脱并收集混合在300至400毫升范围内的洗脱液样品,向所述洗脱液样品中加入氯化钙(CaCl2 ),上疏水层析柱,得到所述疏水层析柱纯化后的融合蛋白;4)电泳鉴定;5)酶切纯化所述疏水层析柱纯化后的融合蛋白。
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