[发明专利]一种利用胭脂红作为探针的共振瑞利散射法测定壳聚糖含量的方法

摘要

本发明公开了一种利用胭脂红作为探针的共振瑞利散射法测定壳聚糖含量的方法。本发明研究发现壳聚糖能与胭脂红结合形成离子缔合物，使共振散射强度显著增强，壳聚糖浓度在一定浓度范围内与△I呈良好线性关系，以此作为壳聚糖的定量基础，建立了利用胭脂红作为探针的共振瑞利散射法测定壳聚糖含量的方法。本方法具有操作简便，快速，成本低，灵敏度高，回收率高、重现性好等优点适合在实际应用中推广使用。

主权项

1.一种利用胭脂红作为探针的共振瑞利散射法测定壳聚糖含量的方法，其特征在于包括如下步骤：1)标准曲线的绘制：向10mL比色管中加入一定浓度梯度的壳聚糖标准溶液，依次分别加入甘氨酸‑盐酸缓冲溶液、胭脂红溶液，混合均匀后定容，得到稀释后的成浓度梯度的壳聚糖待测溶液，水浴加热反应一段时间，冷却至室温，检测壳聚糖待测溶液的共振瑞利散射强度，具体以λex＝λem进行同步扫描，记录RRS光谱，并于366nm处分别测量离子缔合物的I和试剂空白的I0，ΔI＝I‑I0，绘制标准曲线，进一步得线性方程；2)10μg/mL的样品工作液的制备：称取一定量待检测样品的胶囊壳，使用冰醋酸溶解并将其定容得到样品储备液，用漏斗脱脂棉过滤储备液，滤液经6000r/min，离心机离心20min，取上清液2.5mL于100mL容量瓶，定容，得浓度为10μg/mL的样品工作液；3)样品检测：向10mL比色管中，按先后顺序依次加入样品操作液0.8mL，pH3.0的甘氨酸‑盐酸缓冲溶液1.0mL，胭脂红溶液1.0mL，用水定容至10mL刻度线，混合均匀；60℃水浴10min，冷却至室温，检测共振瑞利散射强度，由线性方程计算出待测样品中壳聚糖的浓度。同时做加标回收试验。