[发明专利]一种提高毒害艾美尔球虫卵囊纯化成功率的方法

摘要

本发明主要是提供了一种提高毒害艾美尔球虫卵囊纯化成功率的新方法，具体涉及一种对自然发病的爆发性小肠球虫病鸡群进行解剖并筛取卵囊，接种无球虫感染的健康鸡，通过其粪便和肠道取得符合条件的高致病性高保护性的毒害艾美尔球虫卵囊，该方法能够大大提高毒害艾美尔球虫卵囊纯化的成功率，降低人力物力投入，提高科研及生产效率。

主权项

1.一种提高毒害艾美尔球虫卵囊纯化成功率的方法，包括以下步骤：(1)从自然发病的爆发性小肠球虫的鸡群中选取发病2天的病鸡10只。(2)把10只鸡分别放血致死，切除头颈部及腿部，剥离鸡体表皮及羽毛，用酒精喷灯快速灼烧胴体表面，把灼烧后的胴体分为2组，每组5只，分别放置到两个无任何球虫卵囊的洁净操作台上。(3)用灭菌的器械剖开其中一组鸡的腹腔，无菌操作取出十二指肠和小肠，把肠道及肠内容物加水后匀浆，匀浆液过100-200目滤网，滤液用离心机2000r/min离心5-15min，弃上清留沉淀，用100ml 2.5％的重铬酸钾溶液冲洗沉淀，把沉淀悬液倒入250ml锥形瓶中，放进恒温震荡培养箱中28℃、100r/min培养48h。得到卵囊A。(4)采用步骤(3)中的方法处理另一组鸡的盲肠，得到卵囊B。(5)取1日龄无球虫感染的鸡2只，分别在3-28日龄分6次接种卵囊A。40日龄时把2只鸡转移至另一个灭菌的隔离器中，并接种卵囊B 1000个/只。47日龄时按步骤(2)和(3)的方法处理鸡的盲肠，得到卵囊C。(6)取7日龄无球虫感染的鸡10只，卵囊C适量，用玻璃纸法单卵囊分离技术分别对每只鸡接种，并分别单独隔离饲养，7天后用饱和盐水漂浮法检查每只鸡的粪便，按步骤(2)和(3)的方法处理卵囊阳性鸡的盲肠，得到卵囊D1、D2、D3……(7)分别对卵囊D1、D2、D3……进行毒害艾美尔球虫虫种鉴定，留下符合条件的卵囊，即得到一株或数株纯化的毒害艾美尔球虫虫种。