[发明专利]Mini-III RNA酶、改变Mini-III RNA酶切割RNA序列的特异性的方法及其用途在审
| 申请号： | 201780019412.1 | 申请日： | 2017-01-20 |
| 公开（公告）号： | CN108884450A | 公开（公告）日： | 2018-11-23 |
| 发明（设计）人： | J.布尼克基;K.斯克沃内克;D.格洛;M.库尔克斯卡 | 申请（专利权）人： | 生物技术创新私人有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/22 | 分类号： | C12N9/22 |
| 代理公司： | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人： | 初明明;罗文锋 |
| 地址： | 波兰*** | 国省代码： | 波兰;PL |
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| 摘要： | 本发明的目的是一种具有氨基酸序列的Mini‑III RNA酶，所述氨基酸序列包含受体部分以及在Mini‑III RNA酶结构中分别形成α4螺旋和α5b‑α6环的结构的可移植的α4螺旋和可移植的α5b‑α6环，其中分别形成α4螺旋和α5b‑α6环的结构的片段在结构上对应于分别由SEQ ID NO：1所示的来自枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的Mini‑III RNA酶的氨基酸序列片段46‑52和85‑98形成的α4螺旋和α5b‑α6环的相应结构，其中所述Mini‑III RNA酶在dsRNA切割中显示序列特异性，所述dsRNA切割仅依赖于底物的核糖核苷酸序列并且不依赖于底物结构中二级结构的出现，并且不依赖于其它辅助蛋白的存在，并且其中所述Mini‑III RNA酶不是SEQ ID NO:1的来自枯草芽孢杆菌的Mini‑III蛋白，也不是具有D94R突变的SEQ ID NO：1。本发明还涉及获得嵌合Mini‑III RNA酶的方法、Mini‑III RNA酶编码构建体、具有Mini‑III RNA酶编码基因的细胞、Mini‑III RNA酶用于dsRNA切割的用途以及仅依赖于核糖核苷酸序列的dsRNA切割方法。 | ||
| 搜索关键词： | 切割 核糖核苷酸序列 枯草芽孢杆菌 氨基酸序列 可移植 氨基酸序列片段 编码构建 编码基因 底物结构 二级结构 辅助蛋白 显示序列 底物 嵌合 突变 蛋白 细胞 | ||
【主权项】：
1. 一种具有氨基酸序列的Mini‑III RNA酶，所述氨基酸序列包含受体部分和在Mini‑III RNA酶结构中分别形成α4螺旋和α5b‑α6环结构的可移植的α4螺旋和可移植的α5b‑α6环，其中分别形成α4螺旋和α5b‑α6环结构的片段在结构上对应于分别由SEQ ID NO：1中所示的来自枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的Mini‑III RNA酶的氨基酸序列片段46‑52和85‑98形成的α4螺旋和α5b‑α6环的相应结构，其中所述Mini‑III RNA酶在dsRNA切割中显示出序列特异性，所述dsRNA切割仅依赖于底物的核糖核苷酸序列，并且不依赖于底物结构中二级结构的出现，并且不依赖于其它辅助蛋白的存在，并且其中所述Mini‑III RNA酶不是SEQ ID NO: 1的来自枯草芽孢杆菌的Mini‑III蛋白，也不是具有D94R突变的SEQ ID NO: 1。
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