[发明专利]酶促核酸合成有效
| 申请号： | 201780034503.2 | 申请日： | 2017-03-30 |
| 公开（公告）号： | CN109312493B | 公开（公告）日： | 2022-08-09 |
| 发明（设计）人： | H·H·李;G·M·丘奇;R·卡尔霍 | 申请（专利权）人： | 哈佛学院董事及会员团体 |
| 主分类号： | C40B50/18 | 分类号： | C40B50/18;C12P19/30;C12P19/34;C12Q1/6844 |
| 代理公司： | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人： | 余颖;陶家蓉 |
| 地址： | 美国马*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | 本公开提供了用于制备多核苷酸的方法，其中核苷酸的添加可经物理、化学和/或酶促控制。该方法包括将选定的核苷酸、阳离子、易错或非模板依赖性DNA聚合酶于反应位点组合，所述反应位点包含与其连接并且具有3'末端核苷酸的起始物序列，其中反应试剂可经调节并且处于允许一个或多个选定的核苷酸共价添加至3'末端核酸的情况，从而使得选定的核苷酸成为3'末端核苷酸，并且重复添加步骤直到多核苷酸形成。 | ||
| 搜索关键词： | 核酸 合成 | ||
【主权项】：
1.一种制备多核苷酸的方法，其包括：(a)将反应试剂流动相沿流体通道递送至反应位点，所述反应试剂流动相至少包含易错非模板依赖性DNA聚合酶、选定的核苷酸三磷酸和阳离子，其中所述反应位点包含与其连接并且具有3'末端核苷酸的起始物，其中反应试剂以选定浓度存在于所述反应试剂流动相中，其中所述反应试剂流动相具有选定的体积和选定的流速，以在共价添加一个或多个选定的核苷酸至所述3'末端核苷酸从而使所述选定的核苷酸成为3'末端核苷酸的条件下在反应位点实现选定的停留时间，(b)将有机洗涤流动相以流体流速递送至所述反应位点，以从所述反应位点去除所述反应试剂，和(c)重复步骤(a)和(b)直到所述多核苷酸形成，限制条件是所述多核苷酸形成后不需要进行步骤(b)。
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