[发明专利]选择具有蛋白酶活性的酶的方法在审
| 申请号： | 201780035224.8 | 申请日： | 2017-04-07 |
| 公开（公告）号： | CN109312333A | 公开（公告）日： | 2019-02-05 |
| 发明（设计）人： | R·布拉扎伊;N·托列洛;C·埃姆里克 | 申请（专利权）人： | 诺维信公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 北京尚诚知识产权代理有限公司 11322 | 代理人： | 顾小曼;周琴 |
| 地址： | 丹麦，*** | 国省代码： | 丹麦;DK |
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| 摘要： | 本文在此提供用于提高蛋白酶活性的系统及其组分。该系统利用乳液将合成化合物文库在体外区室化，各化合物具有与蛋白酶底物和选择性标记物连接的基因。表达的具有更高蛋白酶活性的酶将优先使蛋白酶底物水解，而蛋白酶活性较低的酶将使底物保持完整。除去未水解的化合物提供了编码活性更高的蛋白酶变体的富集的基因文库。另外说明了可以用于该方法的合成化合物和乳液。 | ||
| 搜索关键词： | 蛋白酶活性 蛋白酶底物 合成化合物 水解 乳液 选择性标记物 蛋白酶变体 基因文库 系统利用 底物 富集 区室 体外 文库 基因 | ||
【主权项】：
1.一种选择具有蛋白酶活性的多肽的方法，所述方法包括：(i)将多种合成化合物悬浮在水相中，其中所述合成化合物各自包括：(a)编码多肽的多核苷酸；(b)与所述多核苷酸连接的蛋白酶底物；和(c)与所述多核苷酸连接的选择性标记物；其中所述水相包括用于所述多肽表达的组分；(ii)与所述水相形成油包水乳液，其中所述合成化合物在所述乳液的水性液滴中区室化；(iii)在所述乳液的水性液滴内表达所述多肽，其中水性液滴中具有蛋白酶活性的多肽使所述液滴中的蛋白酶底物水解；和(iv)分离所述合成化合物，以回收包含蛋白酶底物的合成化合物和/或其中蛋白酶底物已经被水解的合成化合物。
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