[发明专利]用于海藻宿主细胞的CRISPR-Cas系统

摘要

本发明涉及分子生物学和细胞生物学领域。更具体地，本发明涉及用于网粘菌纲(Labyrinthulomycete)宿主细胞的CRISPR‑Cas系统。

主权项

1.一种非天然存在的或工程化的组合物，其包含CRISPR‑Cas系统的来源，所述CRISPR‑Cas系统包含引导多核苷酸和Cas蛋白，其中所述引导多核苷酸包含引导序列，所述引导序列基本上为宿主细胞中靶多核苷酸的反向互补物，且所述引导多核苷酸可指导Cas蛋白在所述宿主细胞中靶多核苷酸处的结合以形成CRISPR‑Cas复合物，其中所述引导序列基本上是所述宿主细胞的基因组中的5′‑(N)yPAM‑3′多核苷酸序列靶物的(N)y部分的反向互补物，其中y是8‑30的整数，其中PAM是前间区序列邻近基序，其中所述宿主细胞是网粘菌纲(Labyrinthulomycete)，优选破囊壶菌目(Thraustochytriales)的成员，优选破囊壶菌科(Thraustochytriaceae)成员，更优选选自下组的菌属的成员：Aurantiochytrium、Oblongichytrium、裂殖壶菌属(Schizochytrium)、破囊壶菌属(Thraustochytrium)和吾肯氏壶菌属(Ulkenia)，甚至更优选裂殖壶菌属菌种ATCC#20888，且其中PAM优选为选自下列的序列：5′‑XGG‑3′、5′‑XGGXG‑3′、5′‑XXAGAAW‑3′、5′‑XXXXGATT‑3′、5′‑XXAGAA‑3′、5′‑XAAAAC‑3′，其中X可为任何核苷酸或其类似物，优选地，X可为任何核苷酸；且W是A或T。