[发明专利]使用核酸外切酶和链移位的核酸扩增在审
| 申请号： | 201780076807.5 | 申请日： | 2017-10-16 |
| 公开（公告）号： | CN110249058A | 公开（公告）日： | 2019-09-17 |
| 发明（设计）人： | 乔尔乔斯·派特索斯;斯蒂芬·约翰·敏特 | 申请（专利权）人： | 雷沃卢金有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6844 | 分类号： | C12Q1/6844;C12Q1/6853;C12Q1/689 |
| 代理公司： | 中科专利商标代理有限责任公司 11021 | 代理人： | 张国梁;张莹 |
| 地址： | 英国*** | 国省代码： | 英国;GB |
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| 摘要： | 提供了扩增核酸序列的方法。该方法包括提供扩增混合物，其包含能够从5′‑末端朝向3′‑末端消化双链核酸分子的链的核酸外切酶、链移位聚合酶、包含第一和第二核酸链的双链核酸分子、第一核酸引物和适合于供给用于扩增所述待扩增的第一核酸序列的核苷酸。该方法还包括在允许消化、核酸外切酶消化和链移位聚合的条件下实现扩增反应，从而产生包含扩增量的所述第一核酸序列的产物混合物。还提供了使用双链探针确定生物样品中靶核酸序列的存在或数量的方法，所述双链探针在一条链上具有荧光团并且在另一条链上具有其猝灭剂，并且使用变性和再杂交来检测靶标。 | ||
| 搜索关键词： | 核酸外切酶 移位 第一核酸序列 双链核酸分子 双链探针 消化 扩增 条链 靶核酸序列 产物混合物 扩增混合物 核酸扩增 核酸引物 扩增反应 扩增核酸 生物样品 核酸链 核苷酸 聚合酶 荧光团 猝灭剂 变性 靶标 聚合 杂交 检测 | ||
【主权项】：
1.扩增核酸序列的方法，其包括：(a)提供扩增混合物，所述扩增混合物包含：(i)能够实现双链核酸分子的链的消化的核酸外切酶，所述消化从所述链的5′‑末端朝向3′‑末端，(ii)链移位聚合酶，(iii)双链核酸分子，其包含彼此杂交的第一和第二核酸链，包含待扩增的第一核酸序列并具有远离其5′‑末端的第一5′‑末端区的所述第一链具有抵抗通过如(i)所定义的所述核酸外切酶的消化(在该方法的条件下)的核苷酸序列，(iv)第一核酸引物，其具有与所述第一核酸的第一末端区相同的核苷酸序列，并且包含相同的消化抗性区，和(v)核苷酸，其适合于供给用于扩增所述待扩增的第一核酸序列；和(b)在允许消化、核酸外切酶消化和链移位聚合的条件下实现扩增反应，从而产生包含扩增量的所述第一核酸序列的产物混合物。
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