[发明专利]在闪光和辉光反应中检测分析物

摘要

提供了样品中存在或不存在靶细胞的精确测量。例如，样品可以与能够结合到靶细胞的多个转导颗粒混合，该转导颗粒被工程化以包括核酸分子，该核酸分子被配制成一旦颗粒结合到核酸分子并且将核酸分子递送到一个或多个靶细胞中，就使靶细胞产生多个可检测的报道分子。接收与一定量的报道分子相关联的一组信号数据点，并且分析该信号数据点以准确地检测样品中的靶细胞。根据针对峰值收集和分析的数据生成曲线，使用面积比、相对光单元（RLU）的相对变化和线性阈值将该峰值在数学上变换成阳性信号数据点。公开了系统和方法。

主权项

1.一种检测样品中存在一个或多个靶细胞的方法，所述方法包括以下步骤：（a）将所述样品与能够结合到所述一个或多个靶细胞的多个转导颗粒混合，其中所述多个转导颗粒（i）被工程化以包括被配制成使所述一个或多个靶细胞产生多个报道分子的核酸分子，（ii）被配制成结合到所述核酸分子并且将所述核酸分子递送到所述一个或多个靶细胞中，以及（iii）是非复制型的；（b）当所述样品中存在所述一个或多个靶细胞时，在足以表达所述多个报道分子的条件下维持所述样品和所述多个转导颗粒；（c）接收多个信号数据点，每个信号数据点与一定数量的所述多个报道分子相关联，其中所述多个信号数据点指示所述样品中存在所述一个或多个靶细胞；（d）使用所述多个信号数据点生成第一曲线；（e）通过基于所述第一曲线计算以下参数来分析所述第一曲线：曲线下面积（AUC）；峰下面积（A2）；面积比；全局最大强度（globalmaxRLU）；和相对变化（Rvar）；以及（f）比较面积比和Rvar，并且应用线性阈值以识别一组阳性信号数据点，其中所述组阳性信号数据点反映所述样品中存在一个或多个靶细胞。