[发明专利]含硫羟基的切割试剂和氧化洗涤剂在审
申请号: | 201780080043.7 | 申请日: | 2017-10-28 |
公开(公告)号: | CN110506121A | 公开(公告)日: | 2019-11-26 |
发明(设计)人: | M·S·玛尔玛;L·安德鲁兹;B·麦克纳利;A·德鲁西亚;D·埃夫罗尼;E·卡彭特;M·贝塞夫 | 申请(专利权)人: | 奇根科学有限责任公司 |
主分类号: | C12Q1/00 | 分类号: | C12Q1/00;C12Q1/06;C12Q1/6869 |
代理公司: | 11038 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 | 代理人: | 傅宇昌<国际申请>=PCT/US2017 |
地址: | 美国*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | 本发明提供了使用这样的脱氧核苷三磷酸的方法、组合物、混合物和试剂盒,所述脱氧核苷三磷酸包含通过作为可切割的保护基团的包含亚甲基二硫化物的基团进行加帽的3'‑O位置和可逆地联接至所述脱氧核苷的核碱基的可检测标记物。另外,描述了含硫羟基的化合物和含硫羟基的化合物的清除剂。此类化合物为未来的测序技术(包括但不限于边合成边测序(Sequencing by Synthesis))提供了新的可能性。 | ||
搜索关键词: | 脱氧核苷三磷酸 硫羟基 可检测标记物 测序技术 二硫化物 脱氧核苷 混合物 核碱基 清除剂 试剂盒 亚甲基 可逆 测序 加帽 联接 切割 合成 | ||
【主权项】:
1.用于检测在DNA序列中的经标记的核苷酸的方法,其包括下列步骤:/na)提供核酸模板和能够与所述模板杂交的引物以便形成引物/模板杂交复合物,包含含硫羟基的化合物的切割试剂,以及切割清除剂试剂;/nb)向所述引物和模板添加DNA聚合酶和第一脱氧核苷三磷酸以便产生反应混合物,所述第一脱氧核苷三磷酸包含核碱基和糖,所述糖在3‘-O上包含可切割的保护基团,其中所述可切割的保护基团包含亚甲基二硫化物,其中所述脱氧核苷三磷酸进一步包含通过可切割的含氧亚甲基二硫化物的连接体附着至所述核碱基的第一可检测标记物;/nc)使所述反应混合物经历使得由DNA聚合酶催化的引物延伸反应成为可能的条件,以便产生经修饰的引物/模板杂交复合物,其中所述第一脱氧核苷三磷酸被掺入;/nd)检测在所述经修饰的引物/模板杂交复合物中的所述脱氧核苷三磷酸的所述第一可检测标记物;/ne)在条件下引入所述切割试剂,以便从所述经修饰的引物/模板杂交复合物中去除所述可切割的保护基团和所述可检测标记物;和/nf)引入所述切割清除剂试剂。/n
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