[发明专利]用于从单T细胞克隆功能性T细胞受体的方法和材料在审
| 申请号： | 201780084892.X | 申请日： | 2017-11-29 |
| 公开（公告）号： | CN110267981A | 公开（公告）日： | 2019-09-20 |
| 发明（设计）人： | M·沃伦;C·G·帕诺西斯;A·M·罗威;A·杜克提那维斯;E·舒特勒那维斯 | 申请（专利权）人： | 匹兹堡大学联邦系统高等教育 |
| 主分类号： | C07K14/725 | 分类号： | C07K14/725;C12N15/85;C12N5/10 |
| 代理公司： | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人： | 钱文宇;陈扬扬 |
| 地址： | 美国宾夕*** | 国省代码： | 美国;US |
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| 摘要： | 本文提供了从单T细胞克隆功能性TCR所涉及的方法和材料。例如，提供了用于获得编码来自单T细胞的TCR的核酸并排列所述核酸以形成经成功设计以表达TCR的核酸载体的方法和材料，用于获得编码来自单T细胞的TCR的核酸并排列所述核酸以形成经成功设计以表达TCR的核酸载体，用于制备所述试剂盒的方法，经设计以扩增特定哺乳动物物种的功能性αβ或γδTCR的各个表达的V区段的两个可变区的整个编码序列的核酸引物的集合，使用所述核酸引物的集合以从单T细胞克隆功能性TCR的方法，和包含所述核酸引物的集合以从单T细胞克隆功能性TCR的试剂盒。 | ||
| 搜索关键词： | 核酸 核酸引物 集合 核酸载体 试剂盒 哺乳动物物种 编码序列 可变区 扩增 制备 成功 | ||
【主权项】：
1.一种获得多个核酸载体的方法，所述核酸载体包含编码功能性T细胞受体的核酸，其中，所述方法包括：(a)获得包含多个分开的位置的装置，其中各个所述分开的位置包含由获自单T细胞的RNA产生的cDNA，所述单T细胞经分选进入所述分开的位置，(b)进行巢式扩增程序，采用各所述多个分开的位置的cDNA为模板，以获得各所述多个分开的位置的cDNA的第一扩增产物和第二扩增产物，其中，所述第一扩增产物包含编码Vα或Vγ区段的核酸，并且其中，所述第二扩增产物包含编码Vβ或Vδ区段的核酸，和(c)将各所述多个分开的位置的cDNA的所述第一扩增产物和所述第二扩增产物组装进入核酸载体，以获得各所述多个分开的位置的cDNA的组装的核酸载体，其中，各所述多个分开的位置的cDNA的所述组装的核酸载体包含编码功能性T细胞受体的核酸。
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