[发明专利]用于通过核酸聚合酶对衬底多核苷酸进行大小受控的同聚物加尾的方法和组合物

摘要

本发明涉及用于通过核酸聚合酶对衬底多核苷酸进行大小受控的同聚物加尾的方法和组合物。更具体而言，本发明涉及用于将具有特定长度的尾部添加至衬底多核苷酸的方法和组合物。本发明还涵盖用于将所加尾的衬底固定至固体支持物的方法和组合物。本公开预期衰减子分子是与添加至衬底多核苷酸的尾部序列缔合，并且控制尾部序列至所述衬底多核苷酸的3'末端的所述添加的任何生物分子。添加至所述衬底多核苷酸的序列本文称为尾部序列，或简称尾部，并且将核苷酸添加至衬底多核苷酸的过程本文称为加尾。

主权项

1.一种试剂盒，其包含：模板非依赖性核酸聚合酶；衰减子多核苷酸，其包含衰减子序列和定位在所述衰减子序列附近的序列W，其中所述衰减子序列的长度为10至100个核苷酸，其中所述衰减子多核苷酸包含选自至少一个核糖核苷酸、至少一个脱氧核苷酸、C3间隔区、磷酸、双脱氧核苷酸、氨基以及反向脱氧胸苷的3'封闭基团；衔接子多核苷酸，其中所述衔接子多核苷酸包含与所述衰减子多核苷酸的序列W互补的序列X；与衰减子序列互补的核苷酸；以及连接酶，其中所述衰减子多核苷酸和所述衔接子多核苷酸被退火到一起或者是同一多核苷酸的部分，并且其中所述衰减子多核苷酸控制通过模板非依赖性核酸聚合酶添加至衬底多核苷酸的核苷酸尾部，以及其中所述衔接子多核苷酸与序列W杂交并被连接至衬底多核苷酸的所述核苷酸尾部。