[发明专利]一种大白鼠肋骨缺损模型的构建方法

摘要

本发明涉及生物医学研究技术领域，特别涉及一种大白鼠肋骨缺损模型的构建方法。该方案中包括以下步骤：实验鼠的准备、麻醉、手术处理、术后护理、体重检测及取材分析，分析结果显示，手术显著减少了骨缺损部位的矿化组织，最大扭矩，刚度以及断裂能相比正常组有显著降低，证明造模成功，成模典型，与临床一致性很高。本发明为探明骨缺损发生的病因及有效的临床治疗方案提供与人类相关的实验数据，本方案的建模过程安全、快捷、操作简便、重复性高。

主权项

1.一种大白鼠肋骨缺损模型的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：实验鼠的准备将实验动物饲养在普通级动物房中饲养，保持室内温度为20‑25 ℃，相对湿度40 ‑ 70%，动物自由取食，自由饮水，饮用水均为经净水器净化后的自来水，符合WHO饮用水规范；S2：麻醉将实验鼠分成两组，一组为手术处理组，一组为对照组；首先肌肉注射0.05 mg/kg阿托品，5 min后，肌肉注射4 mg/kg氯胺酮，进行麻醉，此后使用含1.0 % 异氟烷的0.8‑1.5 L/min氧气做维持麻醉；S3：手术过程动物接受手术的当天，将手术部的毛发剃除，并使用碘伏及乙醇清洁消毒围手术区域，随后实验鼠被放在手术台上，四肢固定，将手术部四周悬浮固定，使用碘伏360度消毒备皮，在手术部位上，于肋骨末端用手术刀做一个小型刺切口，对照组实验鼠仅进行此步操作，无后续操作；用一根1.2 mm直径，5 cm长的克氏针从肋骨末端插入，在确保克氏针固定后，将其插入肋骨骨髓腔0.5 cm，随后在肋骨上做一个 1‑2 cm长的正面切口，钝性分离其上的肌肉，使肋骨暴露，使用手持牵开器将肋骨周围软组织牵开，形成约1cm宽的开口；使用无菌笔在肋骨上标记出需要行截骨术的部位，用牙科钻的震荡锯头在实验鼠肋骨上切除1 cm长的部分，截骨术完成后，检查骨断端，确保没有残余骨膜覆盖在骨截面处；将此前置于肋骨末端的克氏针继续插入，横跨截断处，插入对侧断端1 cm深，切断远端肋骨外露的克氏针，将切断后的断端使用冲头和骨科锤钉入肋骨内；在肋骨截骨部位的软组织处使用可吸收线做连续缝合，但并不拉紧，使其部位形成一个口袋，使得合适的针头可以插入其中并到达克氏针周围区域以方便给药；S4：术后护理术后3天，实验鼠将持续接受丁丙诺啡至少0.02 mg/kg肌肉注射，每天两次，间隔约8小时；手术结束时及术后3天，注射防感染药物；术后3天，每天至少2次监测动物的疼痛，不舒适和其它生命体征；S5：体重检测每三天测量一次动物体重并进行记录，手术处理组和对照组对比分析，并对术后实验鼠进行活动能力评分；S6：取材分析手术60天后，将动物安乐死并取出截骨术后修复的骨段，该骨段暴露后，使用振动锯从克氏针上方处将肋骨截断，用经无菌生理盐水浸泡过的纱布海绵将该骨段包裹，放置于5 mL离心管中，保存于‑20 ℃，在进行骨生物力学检测前，使用微型CT生成骨片段的三维成像及体积骨矿密度。