[发明专利]槐角胰蛋白酶抑制剂的制备、活性测定及抑制常数测定的方法在审
| 申请号： | 201810014808.3 | 申请日： | 2018-01-08 |
| 公开（公告）号： | CN108181370A | 公开（公告）日： | 2018-06-19 |
| 发明（设计）人： | 杨艳;石亚伟 | 申请（专利权）人： | 太原科技大学 |
| 主分类号： | G01N27/447 | 分类号： | G01N27/447;G01N1/28 |
| 代理公司： | 北京卓特专利代理事务所(普通合伙) 11572 | 代理人： | 段宇 |
| 地址： | 030024 山*** | 国省代码： | 山西;14 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种槐角胰蛋白酶抑制剂的制备、活性测定及抑制常数测定的方法，属于胰蛋白酶抑制剂技术领域，提供了一种利用亲和层析方法，从槐角种子中分离出STI的槐角胰蛋白酶抑制剂的制备、活性测定及抑制常数测定的方法，采用亲和层析方法，从槐角种子中分离出STI，用SDS‑聚丙烯酰胺凝胶电泳对纯化产物进行分析得出STI的近似分子量分别为12kD，STI具有较高的热稳定性，在80℃时仍有抑制活性，在37℃时活性达到最高，STI在pH6.5～pH8.5条件下具有较高抑制活性，在pH7.8处活性最高，用Lineweaver‑Burk作图法得知，该抑制剂属竞争性抑制类型，Ki值为3.697×1O‑6mol/L。 | ||
| 搜索关键词： | 胰蛋白酶抑制剂 槐角 常数测定 活性测定 制备 亲和层析 聚丙烯酰胺凝胶电泳 近似分子量 竞争性抑制 纯化产物 活性最高 热稳定性 抑制剂 作图法 分析 | ||
【主权项】：
1.槐角胰蛋白酶抑制剂的制备方法，其特征在于：取去皮磨碎的槐角粉25g，加入5倍量的丙酮于9.6℃下抽脂8小时，在通风橱中用布氏漏斗抽成干粉，加入5倍量20mmol/LTris ‑100mmol/LNaCl pH8.0缓冲液抽提蛋白8小时，然后11000r/min离心20min，取上清，然后再70℃水浴加热10min，再11000r/min离心20min，取上清，用定性滤纸过滤除去杂质，用3kDMWCO(MILLPORE)浓缩至8mL，用亲和层析的方法得到纯化的胰蛋白酶抑制剂。
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