[发明专利]MALDI-TOFMS即用型质控活菌标准品在审
| 申请号： | 201810018888.X | 申请日： | 2018-01-09 |
| 公开（公告）号： | CN108102966A | 公开（公告）日： | 2018-06-01 |
| 发明（设计）人： | 崔生辉;刘娜 | 申请（专利权）人： | 中国食品药品检定研究院 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12N1/04;C12Q1/14;C12R1/445 |
| 代理公司： | 北京汇捷知识产权代理事务所(普通合伙) 11531 | 代理人： | 于鹏 |
| 地址： | 100050*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种MALDI‑TOF MS即用型质控活菌标准品，解决了现有的阳性对照菌株获得时间长的技术问题，属于质谱标准品的技术领域。该活菌标准品，通过以下步骤制备得到：(1)培养目的获得单菌落来源的二代菌株，鉴定确认种属正确；(2)收集新鲜二代菌株，悬浮于冻干保护剂中，制成活菌标准品母液；(3)稀释活菌标准品母液，计算活菌标准品母液中菌株浓度；同时，将稀释后的活菌标准品母液制成菌球，计算获得冻干存活率；(4)依据冻干存活率，制备含有目标菌数的质控活菌标准品，保存于‑20℃。本发明可以充分利用MALDI‑TOF MS鉴定菌株种属快速、高通量的特点，缩短微生物检验的时间，提高检验效率。 | ||
| 搜索关键词： | 标准品 活菌 菌株 母液 质控 存活率 冻干 稀释 制备 冻干保护剂 微生物检验 阳性对照菌 单菌落 高通量 目标菌 菌球 质谱 成活 悬浮 保存 新鲜 检验 | ||
【主权项】：
1.MALDI-TOF MS即用型质控活菌标准品，其特征在于，通过以下步骤制备得到：(1)培养目的获得单菌落来源的二代菌株，经过生化鉴定，确认种属正确；(2)收集新鲜二代菌株，悬浮于冻干保护剂中，涡旋使二代菌株分散成单个菌落，且经5μm滤膜进行过滤，除去未能分散成单个菌落细胞团，制成活菌标准品母液；(3)稀释活菌标准品母液，接种于平板培养基中，经培养对菌落进行计数，结合稀释倍数计算活菌标准品母液中菌株浓度；同时，将稀释后的活菌标准品母液制成菌球，并将菌球接种于平板培养基中，经培养对菌落进行计数，再与冻干前浓度进行比较，计算获得冻干存活率；(4)依据冻干存活率，制备含有目标菌数的质控活菌标准品，保存于-20℃，即为MALDI-TOF MS即用型质控活菌标准品。
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