[发明专利]视网膜色素上皮细胞体外培养方法及其专用培养基有效
| 申请号： | 201810025574.2 | 申请日： | 2018-01-11 |
| 公开（公告）号： | CN108251371B | 公开（公告）日： | 2019-01-25 |
| 发明（设计）人： | 黄伯贤;李红;沈涵;刘庆淮;袁松涛 | 申请（专利权）人： | 苏州市立医院（苏州市妇幼保健院;苏州市中心体检站;苏州市公惠医院;苏州市立医院司法鉴定所;苏州市肿瘤诊疗中心）;江苏省人民医院（南京医科大学第一附属医院） |
| 主分类号： | C12N5/079 | 分类号： | C12N5/079;A61K35/30;A61P9/10;A61P27/02 |
| 代理公司： | 江苏圣典律师事务所 32237 | 代理人： | 杨文晰 |
| 地址： | 215000 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开一种视网膜色素上皮细胞体外培养方法及其专用培养基，即将视网膜色素上皮细胞接种至基础培养基中，每天向基础培养基内加入维生素C和丙戊酸，培养温度37℃±1℃，CO2浓度为5%；本发明提供的培养基和方法可实现高效扩增，所获得的视网膜色素上皮细胞可传代至P8代，干性标记物CD133呈阳性的细胞(即CD133＋视网膜色素上皮细胞)的比例高达99％，而目前不添加添加物的培养基可传代至P4代，有效解决了移植手术供体缺乏的问题，降低了伦理争议。 | ||
| 搜索关键词： | 视网膜色素上皮细胞 传代 细胞体外培养 基础培养基 视网膜色素 培养基 添加物 专用培养基 移植手术 有效解决 维生素C 标记物 丙戊酸 干性 供体 扩增 接种 细胞 | ||
【主权项】：
1.一种视网膜色素上皮细胞体外培养方法，其特征在于，具体步骤如下：将视网膜色素上皮细胞接种至基础培养基中，每天向基础培养基内加入维生素C和丙戊酸；培养条件：温度37℃±1℃，CO2浓度为5%；所述每天向基础培养基内加入维生素C和丙戊酸是指，每天向基础培养基内加入终浓度均为50μg/ml的维生素C和丙戊酸；所述基础培养基配方为：以终浓度计，MEM培养基950ml/L、N1 补充剂10ml/L、L‑谷氨酸10ml/L、青霉素‑链霉素 10ml/L、非必需氨基酸 10ml/L、牛磺酸 250mg/L、氢化可的松20μg/L、三碘甲状腺氨酸0.013μg/L、肝素2U/ml、人血小板裂解液10ml/L。
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