[发明专利]一种脊髓灰质炎病毒Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型D抗原预包被联合检测方法及其检测试剂盒和应用

摘要

本发明提供一种预包被的可进行批量生产的脊髓灰质炎病毒（Polio virus）Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型D抗原检测方法，采用牛（兔、羊）抗Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒D抗原纯化抗体包被微孔板，并通过保护剂对包被板和包被抗体进行保护后制备成预包被板，同时配套辣根过氧化物酶标记的牛（兔、羊）抗Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒酶标抗体和其他试剂。该方法（试剂）可以对脊髓灰质炎病毒Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型D抗原进行特异性的定性和定量检测，对脊髓灰质炎病毒Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型C抗原和其他肠道病毒无交叉，是一种特异性高、灵敏高，使用方便、用途广泛的Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒D抗原联合检测法，在IPV疫苗生产检定中有较高的应用价值。

主权项

1.一种脊髓灰质炎病毒Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型D抗原联合快速定性、定量检测方法，用于非临床疾病诊断治疗和非健康状况判断用途，其特征在于，包括以下步骤：S1、分别对动物抗Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒单价抗体进行制备并纯化，得动物抗Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒D抗原的各型单价纯化抗体；S2、用辣根过氧化物酶通过高碘酸钠法分别对动物抗Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒D抗原的单价纯化抗体进行标记，得动物抗Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒D抗原的检测用酶标抗体，制成单价酶标抗体使用液；S3、以动物抗Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒D抗原单价纯化抗体分别进行酶标检测板的预包被处理，预包被处理中加入保护剂进行封闭保护；所述保护剂包括但不限于以下成分：BSA、明胶，血清、酪蛋白、白蛋白、海藻糖、磷酸盐、碳酸盐中的一种或多种，在载体板上标示三种不同的颜色分别对应各型脊髓灰质炎病毒D抗原，用不同颜色对加入的抗体型别进行区分，制得预包被载体，所得预包被载体能批量制作且能满足检测条件指标下实现长期存放；S4、采用各型预包被载体捕获相应待检抗原形成抗原抗体复合物，再与同型酶标记抗体结合，通过底物催化酶显色，根据显色结果完成对脊髓灰质炎病毒Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ各型D抗原的联合定性检测或定量检测。