[发明专利]提取木豆素、木豆素A、木豆素C、木豆内酯A的工艺

摘要

本发明涉及提取木豆素、木豆素A、木豆素C、木豆内酯A的工艺，所述的提取工艺包括步骤选材、粗粉、热乙醇超声提取、处理DA201、大孔树脂吸附、洗脱、回收乙醇、处理NKA‑9、水洗脱、60%乙醇洗脱、浓缩、拌样、装柱、洗脱、石油醚‑环己烷（101）洗脱、石油醚‑环己烷（51）洗脱步骤，本发明具有原料来源广泛、价格低廉、提取工艺简单、硅胶柱层析工艺简单、分离得到的化合物纯度高，高效液相归一化法纯度均在95%以上，能作为对照品使用的优点。

主权项

提取木豆素、木豆素A、木豆素C、木豆内酯A的工艺，其特征在于：所述的提取工艺包括如下步骤：步骤1：选材,选取一定量的干燥木豆叶；步骤2：粗粉,将步骤1选取的木豆叶放入粉碎机中进行粉碎，得到粗粉颗粒，其中粗粉颗粒的粒径为20‑60目；步骤3：热乙醇超声提取，将步骤2得到的粗粉颗粒放入容器内，加入5倍量的70%热乙醇，超声处理10分钟，过滤，药渣再次加入5倍量的70%热乙醇超声处理一次，将两次得到的超声提取液进行混合，并冷却至室温，得到木豆叶提取液，其中70%热乙醇的温度为50℃；步骤4：处理DA201，分别取体积为DM21容积2倍的4%氢氧化钠溶液、4%盐酸溶液、乙醇依次交替处理；步骤5：大孔树脂吸附，将步骤3得到的超声提取液缓慢加至已经处理好的DA201大孔树脂柱上，流速为5‑10ml/min，并弃去流出液；步骤6：洗脱，取木豆叶质量1倍的70%乙醇洗脱DA201大孔树脂柱，并弃去70%乙醇洗脱液，继续用95%乙醇洗脱DA201大孔树脂柱，其中95%乙醇的质量与木豆叶的质量比为5：1；步骤7：回收乙醇，将步骤6中的洗脱液放入到减压罐内，控制温度为60℃，压力为0.04‑0.1MPa，加热回收乙醇直至没有醇味；步骤8：处理NKA‑9，取体积为NKA‑9容积2倍的4%氢氧化钠溶液在10‑30ml/min流速通过，去离子水洗至流出液为中性，再取体积为NKA‑9容积2倍的4%盐酸溶液在10‑30ml/min流速通过，去离子水洗至流出液为中性，再取体积为NKA‑9容积1倍的95%乙醇洗脱，最后取体积为NKA‑9容积3倍的去离子水洗；步骤9：水洗脱，将步骤7得到的液体以流速10‑20ml/min流入NKA‑9大孔吸附树脂柱，然后水洗脱至流出液为无色，弃去水溶液；步骤10：60%乙醇洗脱，将步骤9的NKA‑9大孔吸附树脂柱继续加入木豆叶质量2倍的60%乙醇洗脱，并收集洗脱液；步骤11：浓缩，将步骤10得到的60%乙醇洗脱液放至薄膜浓缩装置中在温度为60℃、压力为0.04‑0.1mpa的环境中进行浓缩至无醇味，并继续浓缩成干燥的浸膏；步骤12：拌样，将步骤11得到的浸膏中加入2倍量柱层析硅胶，混匀，并低温干燥；步骤13：装柱，取步骤12所得的样品的10倍量柱层析硅胶，装入层析柱，上层装入步骤12样品，最上层再装入空白硅胶，连接压力泵及管路；步骤14：洗脱，用石油醚‑环己烷（40:1） 洗脱，每30ml收集一份，收集第20～30份时进行合并，低温、减压浓缩得木豆素内酯A；步骤15：继续用石油醚‑环己烷（10:1）洗脱，每30ml收集一份，收集第20～30份时进行合并，低温、减压浓缩得木豆素A；收集第31～40份时进行合并，低温减压浓缩得木豆素C；步骤16：继续用石油醚‑环己烷（5:1）洗脱，每30ml收集一份，收集第20～30份时进行合并，低温、减压浓缩得木豆素。