[发明专利]制备ROSA26基因突变及富含不饱和脂肪酸动物的方法在审
| 申请号： | 201810038598.1 | 申请日： | 2018-01-16 |
| 公开（公告）号： | CN108192928A | 公开（公告）日： | 2018-06-22 |
| 发明（设计）人： | 吴晓洁;王友亮;潘登科;郗永义;林艳丽;钟荣斌;陈红星 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 |
| 主分类号： | C12N15/90 | 分类号： | C12N15/90;C12N9/22;C12N5/10;A01K67/027 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅 |
| 地址： | 100071*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了制备ROSA26基因突变及富含不饱和脂肪酸动物的方法。本发明公开的突变ROSA26基因的方法采用CRISPR/Cas9系统进行，CRISPR/Cas9系统包括靶向ROSA26基因的sgRNA，sgRNA的靶序列为序列表中序列2的核苷酸序列；该方法通过向受体细胞中导入sgRNA和Cas9以及含有Sfat1基因表达盒的供体DNA实现ROSA26基因的突变。实验证明，利用本发明的方法可以成功敲除ROSA26基因，并定点整合Sfat1基因，最终成功得到表达Sfat1的动物。 | ||
| 搜索关键词： | 基因 不饱和脂肪酸 基因突变 富含 制备 突变 核苷酸序列 基因表达盒 定点整合 受体细胞 供体DNA 靶向 敲除 成功 | ||
【主权项】：
1.突变ROSA26基因的方法，其特征在于：所述方法采用CRISPR/Cas9系统进行，所述CRISPR/Cas9系统包括靶向ROSA26基因的sgRNA，所述sgRNA的靶序列为如下A1)、A2)或A3)：A1)序列表中序列2的核苷酸序列；A2)与A1)限定的DNA序列具有75％或75％以上同一性的由A1)衍生的DNA序列；A3)在严格条件下与A1)限定的DNA序列杂交的由A1)衍生的DNA序列。
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