[发明专利]一种反复脑缺血再灌注损伤小鼠模型的建立方法

摘要

本发明涉及一种反复脑缺血再灌注损伤小鼠模型建立方法，包括如下操作：选取6‑7周龄的小鼠，麻醉所选取的小鼠；固定小鼠体位并进行备皮；消毒小鼠颈部皮肤，剪开颈部皮肤并钝性分离皮下组织；暴露小鼠的双侧颈总动脉；将小鼠双侧颈总动脉与周围组织、神经分离；夹闭双侧颈总动脉，并剪小鼠尾放血3ml，热凝止血；停止夹闭，恢复血流；继续实施步骤(4)和(5)，并且不再剪小鼠尾放血；实施结束后，缝合小鼠皮肤，反复脑缺血再灌注损伤小鼠模型建立完成；本发明所述建立方法符合目前人类脑缺血疾病的发病基本理念，能真实模拟脑缺血疾病的病理过程，并且建立的反复脑缺血再灌注损伤小鼠模型成功率高，稳定性好。

主权项

1.一种反复脑缺血再灌注损伤小鼠模型的建立方法，其特征在于，包括如下具体步骤：步骤1、选取6-7周龄的小鼠，麻醉所选取的小鼠；步骤2、固定小鼠体位，采用剃毛器具去除小鼠颈部毛发进行备皮；步骤3、消毒小鼠颈部皮肤，剪开颈部皮肤并钝性分离皮下组织；步骤4、暴露小鼠的出双侧颈总动脉，用医用镊子将小鼠颈部皮肤提起，并用眼科直剪沿小鼠头尾方向剪开一个切口，再用医用镊子沿上下方向扩展切口1cm；步骤5、将双侧颈总动脉与周围组织、神经进行分离；5.1、鉴于小鼠颈总动脉和神经并行在气管同侧，使用第一只镊子的单侧镊腿沿气管顺势向下将颈总动脉挑住，并保持在气管平行位置；5.2、再用第二只镊子两侧镊腿置于动脉和神经下面，固定保持在气管平行位置，退出第一只镊子的单侧镊腿；将第一只镊子的单侧镊腿伸入动脉与神经之间，第一只镊子的单侧镊腿的锯齿面朝向颈总动脉，光滑面朝向神经，沿血管走行方向滑动一次，分离出长3mm的缝隙；退出第二只镊子，此时小鼠的神经在下、颈总动脉在上，第一只镊子的单侧镊腿在两者之间；使用第一只镊子抬起颈总动脉高出气管水平，以增大颈总动脉与神经之间缝隙宽度；使用第二只镊子的单侧镊腿伸入缝隙，第二只镊子的单侧镊腿的光滑面朝向神经侧，在神经血管粘连出轻轻滑动，继而剥离，直至剥离长度达到8mm，退出第二只镊子的单侧镊腿；仔细观察颈总动脉，单纯的颈总动脉因为失去了神经的伴行和包膜的包裹，颜色呈红色，没有光泽，至此能够确认小鼠颈总动脉与周围组织、神经完成分离，并将用生理盐水湿润的手术丝线穿过颈总动脉下，颈总动脉两侧丝线分别预留3cm；步骤6、夹闭小鼠双侧颈总动脉，并使用眼科直剪剪小鼠尾，放血3ml，热凝止血；优选的，在夹闭过程中，在小鼠颈部两侧加垫纱布，抬高动脉夹的尾部，使动脉夹平放，避免动脉夹夹闭血管后因为自重斜落在颈部皮肤上，形成杠杆，高高挑起颈动脉，使其因牵拉或干燥而造成损伤；步骤7、停止夹闭小鼠双侧颈总动脉，恢复血流；步骤8、继续实施步骤(4)和(5)，并且不再剪小鼠尾放血；步骤9、实施步骤(4)和(5)结束后，缝合小鼠皮肤，反复脑缺血再灌注损伤小鼠模型建立完成。