[发明专利]一种植物RNAi表达载体及其构建方法和应用有效
| 申请号： | 201810046195.1 | 申请日： | 2018-01-17 |
| 公开（公告）号： | CN108342409B | 公开（公告）日： | 2021-05-14 |
| 发明（设计）人： | 李成伟;廖立冰;于德水;张菊;张怡;徐克东;刘坤;谭光轩;陈璨;何勇;付贝贝 | 申请（专利权）人： | 周口师范学院 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;C12N5/10;C12N15/66 |
| 代理公司： | 郑州大通专利商标代理有限公司 41111 | 代理人： | 陈勇 |
| 地址： | 466001 河南省*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种植物RNAi表达载体及其构建方法和应用。本发明以商业化的植物表达载体pCambia2301和pHANNIBIAL为基础，构建了含有CaMV35S启动子、内含子、OCS终止子、两个方向相反的Gateway盒子的植物RNAi表达载体，该载体可利用Gateway技术进行植物目的基因沉默载体的构建；本发明还建立了所述植物RNAi表达载体的构建方法，以及利用融合PCR进行一步Gateway反应构建含有目的基因RNAi沉默载体的应用。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 植物 rnai 表达 载体 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.一种植物RNAi表达载体，其特征在于，所述植物RNAi表达载体含有目的基因片段表达元件，所述目的基因片段表达元件含有CaMV35S启动子、内含子、OCS终止子、两个方向相反的Gateway盒子；所述内含子位于两个方向相反的Gateway盒子之间，用于表达发卡RNA结构中的环；所述Gateway盒子含有attR1位点、attR2位点、CmR基因、ccdB基因和一个EcoRI酶切位点，Gateway盒子用于表达方向相反的目的基因片段，构成发卡RNA结构中的臂。
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