[发明专利]一种立克次氏体巢式PCR特异性引物及检测试剂盒与巢式PCR检测方法

摘要

一种立克次氏体巢式PCR特异性引物及检测试剂盒与巢式PCR检测方法，本方法的模板DNA制备步骤简单费用低，本方法检测非常方便快捷，并能提高检测方法的特异性及敏感性，单蜱虫甚至蜱虫的部分组织器官提取的微量基因组DNA即可作为模板进行鉴定，针对立克次氏体的pCS20为靶基因的特异性区域，设计4条特异性引物，解决了现有PCR检测技术低特异性和低敏感性，扩增时容易产生假阳性、蜱虫体内立克次氏体含量较低时容易漏检的缺陷，本发明方法反应特异性更强、敏感性更高，该方法专用于立克次氏体精准检测，应用前景广阔。

主权项

1.一种立克次氏体巢式PCR特异性引物，其特征在于，包括设计的两对特异性引物，具体为：外引物EF1∶5′-TTT-CCC-TAT-GAT-ACA-GAA-GGT-AAC-3′；内引物ER1：5′-AAA-GCA-AGG-ATT-GTG-ATC-TGG-ACC-3′；外引物EF2：5′-ACT-AGT-AGA-AAT-TGC-ACA-ATC-TAT-3′；内引物ER2：5′-TGA-TAA-CTT-GGT-GCG-GGA-AAT-CCT-T-3″。