[发明专利]一种双芽巴贝斯虫巢式PCR特异性引物及检测试剂盒与巢式PCR检测方法

摘要

一种双芽巴贝斯虫巢式PCR特异性引物及检测试剂盒与巢式PCR检测方法，本方法的模板DNA制备步骤简单费用低，本方法检测非常方便快捷，并能提高检测方法的特异性及敏感性，单蜱虫甚至蜱虫的部分组织器官提取的微量基因组DNA即可作为模板进行鉴定，针对双芽巴贝斯虫的RAP‑1为靶基因的特异性区域，设计4条特异性引物，解决了现有PCR检测技术在诊断寄生在蜱体内的巴贝斯虫时，牛双芽巴贝斯虫与牛巴贝斯虫之间常出现交叉反应的缺陷，本发明方法反应特异性更强、敏感性更高，该方法专用于牛双芽巴贝斯虫病精准检测，应用前景广阔。

主权项

1.一种双芽巴贝斯虫巢式PCR特异性引物，其特征在于，包括设计的两对特异性引物，具体为：外引物BF1：5＇-CAT-CTA-ATT-TCT-CTC-CAT-ACC-CCT-CC-3′；内引物BR1：5＇-CCT-CGG-CTT-CAA-CTC-TGA-TGG-CAA-AG-3′；外引物BF2：5′-CGC-AAG-CCC-AGC-AGG-CCC-CGG-TGC-3′；内引物BR2：5′-CCG-ACC-TGG-ATA-GGC-TGT-GTC-ATG-3′。