[发明专利]一种核酸提取方法在审
| 申请号： | 201810051978.9 | 申请日： | 2018-01-19 |
| 公开（公告）号： | CN108103056A | 公开（公告）日： | 2018-06-01 |
| 发明（设计）人： | 曾庆 | 申请（专利权）人： | 武汉永瑞康华医学检验所有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 北京君泊知识产权代理有限公司 11496 | 代理人： | 王程远 |
| 地址： | 430000 湖北省武汉市东湖新技术开*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种核酸提取方法，包括以下步骤：S1、取核酸样品加裂解液A，于30～50℃搅拌，温度升至50～70℃，加入裂解液B继续搅拌，得混合液A；S2、将带有磁珠的磁棒置于混合液A中，搅拌；S3、将磁棒升起，弃去反应器中的液体，再向反应器中加入清洗剂，然后将磁棒恢复原位，再进行搅拌，重复升起磁棒、弃去液体、加清洗剂、恢复磁棒、搅拌的操作2～3次，再将磁棒升起，弃去反应器中的液体，向反应器中加入洗脱剂，进行核酸的洗脱；S4、核酸的预处理。本发明提出的提取方法，操作简单，核酸样品的裂解完全，核酸与裂解物的分离效果好，提取效率高，提取的核酸纯度高，完整度高，对后续检测无影响。 | ||
| 搜索关键词： | 磁棒 反应器 核酸 清洗剂 核酸提取 核酸样品 混合液 裂解液 预处理 分离效果 核酸纯度 提取效率 裂解物 完整度 洗脱剂 磁珠 裂解 洗脱 恢复 检测 重复 | ||
【主权项】：
1.一种核酸提取方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、样品的裂解：取核酸样品置于反应器中，向反应器中加入裂解液A，开启搅拌套，于30～50℃，搅拌10～20min，再将反应器的温度升至50～70℃，向反应器中加入裂解液B，继续搅拌10～20min，得混合液A；S2、磁珠的吸附：将带有磁珠的磁棒置于装有混合液A的反应器中，在搅拌套的搅拌作用下混合物A中的核酸吸附在磁棒上；S3、清洗和洗脱：将磁棒升起，弃去反应器中的液体，再向反应器中加入清洗剂，然后将磁棒恢复原位，再进行搅拌，重复升起磁棒、弃去液体、加清洗剂、恢复磁棒、搅拌的操作2～3次，再将磁棒升起，弃去反应器中的液体，向反应器中加入洗脱剂，进行核酸的洗脱；S4、核酸的预处理：将洗脱后的核酸进行末端修复、3’末端加A、接头连接、亚硫酸氢盐处理、PCR扩增，然后进行上机测试，完成核酸的提取。
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