[发明专利]用于猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒以及猪轮状病毒检测的DPO引物组及其应用

摘要

本发明公开了一种用于猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒以及猪轮状病毒检测的DPO引物组及其应用。本发明针对TGEV‑N基因、PEDV‑N基因和PRoV‑VP7基因分别设计了一对DPO引物，建立了猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒和猪轮状病毒的多重DPO real‑time RT‑PCR检测方法。结果显示，该方法的检测限为5.3×100copies/μL，在40℃‑65℃退火温度范围内均可高效扩增靶基因片段，表明该方法退火温度范围宽，同时DPO引物特异性强，PCR反应过程中未产生非特异性扩增。本发明多重DPO real‑time RT‑PCR检测方法设计简单、特异性强、灵敏度高，为TGEV、PEDV和PRoV三种致猪病毒性腹泻病病原的快速准确检测提供了新的技术手段。

主权项

1.用于猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒以及猪轮状病毒同时检测的DPO引物组，其特征在于由分别用于猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒以及猪轮状病毒检测的三对DPO引物对组成；其中，用于猪流行性腹泻病毒检测的DPO引物对如下所示：TGEV-DPO-F：CTGTTCTTGCCGCACTTAAAAIIIIIGGTGTTGACTGEV-DPO-R：TAGCTCCATAAAATCTTGTCACATCIIIIITACCTGCAG其中，用于猪传染性胃肠炎病毒检测的DPO引物对如下所示：PEDV-DPO-F：GGTATTGGAGAAAATCCTGACAGGIIIIIGCAACAGCAPEDV-DPO-R：GACGCATCAACACCTTTTTCGIIIIITTCCGCATC其中，用于猪轮状病毒检测的DPO引物对如下所示：PRoV-DPO-F：TGTTTTTAACAAAAGGATIIIIIACAGGGTCAPRoV-DPO-R：CTGTAGTCGAACATCCTAIIIIIAGAGTCTGC其中，I表示次黄嘌呤核苷。