[发明专利]利用抗病基因识别无毒效应蛋白以鉴定具有分泌功能信号肽的方法有效
申请号: | 201810055476.3 | 申请日: | 2018-01-19 |
公开(公告)号: | CN108359689B | 公开(公告)日: | 2021-03-23 |
发明(设计)人: | 阴伟晓;罗朝喜;谢松霖;林杨;田振东 | 申请(专利权)人: | 华中农业大学 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;C12N15/31;A01H5/00;A01H6/82 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王文君;陈征 |
地址: | 430070 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明提供了一种利用抗病基因识别无毒效应蛋白以鉴定具有分泌功能信号肽的方法,包括以下步骤:(1)将待鉴定信号肽连接致病疫霉无毒效应蛋白Avr3a的C端构建表达载体,所述致病疫霉无毒效应蛋白Avr3a的C端氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示;(2)将步骤(1)构建的表达载体转化感受态细胞;(3)将步骤(2)的感受态细胞和含有抗病基因的感受态细胞共同注射入植物细胞中,观察注射位点坏死情况,若注射位点坏死,则待检测信号肽不具有分泌功能,若注射位点无坏死,则待检测信号肽具有分泌功能。 | ||
搜索关键词: | 利用 抗病 基因 识别 无毒 效应 蛋白 鉴定 具有 分泌 功能 信号肽 方法 | ||
【主权项】:
1.一种利用抗病基因识别无毒效应蛋白以鉴定具有分泌功能信号肽的方法,其特征在于,所述抗病基因能够在细胞内识别无毒效应蛋白,包括以下步骤:(1)将待鉴定信号肽连接无毒效应蛋白C端构建表达载体;(2)将步骤(1)构建的表达载体转化感受态细胞;(3)将步骤(2)的感受态细胞和含有抗病基因的感受态细胞共同注射入植物细胞中,观察注射位点坏死情况,若注射位点坏死,则待检测信号肽不具有分泌功能,若注射位点无坏死,则待检测信号肽具有分泌功能。
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