[发明专利]一种NT-3转染BMSCs纳米微球控释体的制备方法及其应用

摘要

本发明属于纳米微球控释体制备技术领域，特别是涉及一种NT‑3基因转染BMSCs纳米微球控释体的制备方法及其应用。采用纳米微球自组装技术将一种生物因子NT‑3基因转染到BMSCs，通过可降解生物材料壳聚糖构建成通透性更好的纳米微球控释体，从而得到NT‑3基因转染BMSCs纳米微球控释体，转染率更高，毒性更小，形态更加均匀，高分子生物亲和力更强，并且更加接近临床应用。

主权项

1.一种NT-3基因转染BMSCs纳米微球控释体的制备方法，其特征在于：包括以下步骤，(1)将不同相对分子量的壳聚糖分别溶解于缓慢加热的1％乙酸溶液，待完全溶解后用NaOH调节pH值至5.0-6.5；(2)将上述溶液通过PBS磷酸盐缓冲液稀释到壳聚糖浓度为0.02％(w/v)，乙酸浓度为3-7mmoL/L；(3)通过0.15-0.35μm的过滤器进行过滤，得到壳聚糖溶液备用；(4)将浓度为90-120μg/ml的pEGFP-C1溶解于3-8mmoL/L的Na2SO4中；(5)将传代培养的BMSCs加入到步骤(3)所得到的壳聚糖溶液中；将步骤(4)中得到的溶液与NT-3溶液混合后；然后将二者等体积分别加热至50-65℃后，再进行混合，涡旋30s后静止30min，即得NT-3基因转染的BMSCs纳米微球控释体。