[发明专利]用于鉴别沙门氏菌和单增李斯特菌的检测分析方法

摘要

本发明公开了一种用于鉴别沙门氏菌和单增李斯特菌的检测分析方法，其包括以下步骤：(1)样品的制备；(2)样品的测定：采用近红外光谱仪对沙门氏菌、单增李斯特菌的各组分进行近红外光谱透射扫描；(3)数据处理：将处理后的光谱数据利用主成分分析法PCA法进行数据的处理，选取前两个主成分的得分值，并采用分析软件OPUS 6.5中主成分分析法对光谱数据进行分析。本发明通过测定沙门氏菌、单增李斯特菌等致病菌的近红外光谱图，利用基于主成分分析技术的投影判别对光谱数据进行分析，结果表明，不论是利用全细胞、细胞壁还是细胞质的近红外光谱分析，都可以通过本发明的方法将沙门氏菌和单增李斯特菌区分开来。

主权项

1.用于鉴别沙门氏菌和单增李斯特菌的检测分析方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)样品的制备：选择对数期的沙门氏菌全细胞制备悬液，以转速3 000r.min-1离心分离湿菌体，以无菌水分三次洗涤沉淀部分，充分振荡摇匀使菌体分散开来，平板菌落计数法进行菌落计数，另用移液枪移取1mL菌液于大试管中，加入9mL无菌水，充分振荡摇匀形成10倍稀释菌悬液，然后逐级进行19次10倍稀释，制成一组20个浓度梯度的沙门氏菌全细胞悬液，浓度梯度值呈比差为10的等差序列，备用；一组20个浓度梯度的单增李斯特氏菌全细胞悬液的制备同沙门氏菌全细胞悬液制备过程；用超声波细胞粉碎仪破碎沙门氏菌的全细胞，以转速15 000r.min-1离心分离，沉淀部分为细胞壁、上清液为细胞质，将细胞质悬液充分振荡摇匀，用移液枪移取1mL菌液于大试管中，加入9mL无菌水，充分振荡摇匀形成10倍稀释菌悬液，然后逐级进行19次10倍稀释过程，制成一组浓度梯度的沙门氏菌细胞质悬液，20个浓度梯度值呈比差为10的等差序列，备用；一组20个浓度梯度的单增李斯特氏菌细胞质悬液的制备同沙门氏菌细胞质悬液制备过程；一组20个浓度梯度的沙门氏菌细胞壁悬液的制备同沙门氏菌细胞质悬液制备过程；一组20个浓度梯度的单增李斯特氏菌细胞壁悬液的制备同单增李斯特氏菌细胞质悬液制备过程；(2)样品的测定：采用近红外光谱仪对沙门氏菌、单增李斯特菌的各组分进行近红外光谱透射扫描；(3)数据处理：将处理后的光谱数据利用主成分分析法PCA法进行数据的处理，选取前两个主成分的得分值，并采用分析软件OPUS 6.5中主成分分析法对光谱数据进行分析。