[发明专利]基于荧光共振能量转移的均相荧光检测血清蛋白的方法在审
| 申请号： | 201810073116.6 | 申请日： | 2018-01-25 |
| 公开（公告）号： | CN108226122A | 公开（公告）日： | 2018-06-29 |
| 发明（设计）人： | 华权高;沈鹤霄;徐春雷 | 申请（专利权）人： | 武汉生之源生物科技股份有限公司 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64;G01N33/533 |
| 代理公司： | 武汉智嘉联合知识产权代理事务所(普通合伙) 42231 | 代理人： | 黄君军 |
| 地址： | 430206 湖北省武汉市东湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种基于荧光共振能量转移的均相荧光检测血清蛋白的方法，以荧光染料标记纳米抗体为能量供体，另以相应荧光淬灭剂标记同种纳米抗体或者配对纳米抗体为能量受体；本发明采用纳米抗体，稳定性好，且对血清中的样本检测基本无影响，以荧光染料标记纳米抗体为能量供体，另以相应荧光淬灭剂标记同种纳米抗体或者配对纳米抗体为能量受体，采用双抗体夹心的方法有效解决了免疫分析方法中存在的灵敏度低以及血清样本的氧化还原物质的影响的缺点，保证了方法的快速灵敏。 | ||
| 搜索关键词： | 纳米抗体 荧光共振能量转移 荧光染料标记 荧光淬灭剂 能量供体 能量受体 血清蛋白 荧光检测 配对 氧化还原物质 双抗体夹心 免疫分析 血清样本 样本检测 有效解决 灵敏度 血清 灵敏 保证 | ||
【主权项】：
1.一种基于荧光共振能量转移的均相荧光检测血清蛋白的方法，其特征在于，以荧光染料标记纳米抗体为能量供体，另以相应荧光淬灭剂标记同种纳米抗体或者配对纳米抗体为能量受体，具体包括如下步骤：步骤1、以荧光染料标记待测抗原的纳米抗体；步骤2、以相应荧光染料淬灭剂标记同种纳米抗体或者配对纳米抗体，所述荧光染料和相应荧光染料淬灭剂为符合FRET特征的试剂对；步骤3、配制几个已知浓度梯度的标准抗原溶液，在几个所述标准抗原溶液中均加入步骤1获得的荧光标记纳米抗体和步骤2中获得的淬灭剂标记抗体，在pH6‑8的缓冲液中混合均匀，温育30min，得到不同的混合体系；步骤4、免疫反应完成后，得到所述多个标准抗原溶液的的荧光强度，以及荧光强度的猝灭程度与浓度之间的关系，测试血样中未知浓度待测抗原样本的荧光强度，根据所述关系即可得到待测抗原的浓度。
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