[发明专利]一种测定β-淀粉酶活力的方法

摘要

本发明公开了一种简单高效测定β‑淀粉酶活力的方法，属于淀粉酶领域。β‑淀粉酶活力的测定方法有DNS试剂显色法和对硝基苯酚麦芽戊糖苷法。DNS法耗时长、灵敏度低，其测定的β‑淀粉酶活力值会受到α‑淀粉酶的影响，而对硝基苯酚麦芽戊糖苷法简便快速，灵敏度高，但是只能表示β‑淀粉酶的相对酶活。因此，本发明通过将DNS试剂显色法和对硝基苯酚麦芽戊糖苷法进行线性拟合，结合两者的优势，建立了一种操作简单、灵敏度高的可测定β‑淀粉酶绝对酶活值的β‑淀粉酶活力测定方法。采用该方法可以简单快速地测定出无论是纯化β‑淀粉酶还是β‑淀粉酶酶制剂混合物中β‑淀粉酶的绝对酶活值，初步应用结果显示该优化方法结果也较为准确，可以进一步推广。

主权项

1.一种测定β-淀粉酶活力的方法，其特征在于，所述方法是联合采用对硝基苯酚麦芽戊糖苷法和DNS法测定待测样品中β-淀粉酶活力，所述方法中待测样品中β-淀粉酶的浓度为12-60μg/mL，所述方法具体是：/n(1)采用纯化的β-淀粉酶稀释为不同浓度，分别采用对硝基苯酚麦芽戊糖苷法和DNS法测定反应后的吸光值；/n(2)将对硝基苯酚麦芽戊糖苷法和DNS法测定的吸光值进行相关性分析，确定线性浓度范围；/n(3)将纯化的β-淀粉酶稀释至步骤(2)的线性浓度范围内进行检测，建立线性拟合曲线回归方程y＝0.0079x+0.0089，x为DNS法测得的β-淀粉酶的酶活，y为对硝基苯酚麦芽戊糖苷法测得的OD