[发明专利]一种高效的hPSCs向MSCs分化的方法有效
| 申请号： | 201810075968.9 | 申请日： | 2018-01-26 |
| 公开（公告）号： | CN108570448B | 公开（公告）日： | 2019-04-02 |
| 发明（设计）人： | 王淋立;李强;陈月花;莫健 | 申请（专利权）人： | 皓昇莱生物制药有限公司;王淋立 |
| 主分类号： | C12N5/0735 | 分类号： | C12N5/0735 |
| 代理公司： | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人： | 胡辉 |
| 地址： | 510663 广东省广州市广州科*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种高效的hPSCs向MSCs分化诱导的方法，其步骤是：1)将未分化hPSCs细胞株转移到细胞外基质包被的培养板上培养后；换用含有BMP‑SMAD1/5/8信号通路激活剂、TGF‑β1/Activin/Nodal‑SMAD2/3信号通路激活剂、Wnt激活剂、PI3K抑制剂的分化培养基培养；2)去除旧培养基，换含有TGF‑β1/Activin/Nodal‑SMAD2/3信号通路抑制剂分化培养基继续培养；3)将细胞消化并转移到新的培养板上，换含有TGF‑β1/Activin/Nodal‑SMAD2/3信号通路抑制剂分化培养基继续培养；4)将细胞消化并转移到贴壁用培养板上继续培养，获得MSCs。本发明在体外建立了完整的hPSC通过中段原条阶段或侧中胚层阶段定向分化为MSCs的方案方法。相较于常规方法，本技术步骤精简，操作简易，再现性高，仅仅用12天便可以获得表型成熟、高质量的MSCs。 | ||
| 搜索关键词： | 分化培养基 激活剂 培养板 信号通路抑制剂 细胞消化 信号通路 细胞外基质 定向分化 分化诱导 技术步骤 培养基 未分化 细胞株 再现性 中胚层 包被 表型 去除 体外 贴壁 中段 简易 分化 成熟 | ||
【主权项】：
1.一种高效的hPSCs向MSCs分化诱导的方法，其步骤是：1）将未分化hPSCs细胞株转移到细胞外基质包被的培养板上培养后；换用含有BMP‑SMAD1/5/8信号通路激活剂、TGF‑β1/ Activin/ Nodal‑SMAD2/3信号通路激活剂、Wnt激活剂和PI3K抑制剂的分化培养基培养；获得中段原条；2）去除旧培养基，换含有TGF‑β1/ Activin/ Nodal‑SMAD2/3信号通路抑制剂分化培养基继续培养；3）将细胞消化并转移到新的培养板上，换含有TGF‑β1/ Activin/ Nodal‑SMAD2/3信号通路抑制剂分化培养基继续培养；4）将细胞消化并转移到贴壁用培养板上继续培养，获得MSCs；上述获得的MSCs是使用诱导hPSCs通过中段原条阶段向MSCs定向分化的方法来获得的。
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